溴水氧化亚甲蓝荧光法测定头孢氨苄与头孢拉定.doc

溴水氧化亚甲蓝荧光法测定头孢氨苄与头孢拉定刘奇 1? ,杨红瑞,王爱军(河南师范大学化学与环境科学学院,河南新乡 453007 ) 摘要:基于头孢菌素与 Br2 发生氧化反应,剩余的 Br2 能氧化亚甲蓝( MB ) 使其荧光强度降低, 通过测定亚甲蓝的荧光间接测定头孢菌素的含量,结合β- 环糊精( β-CD )可以显著增敏亚甲蓝的荧光,建立了一种简单、快速、灵敏的测定头孢氨苄与头孢拉定的新方法。在优化的实验条件下, 测定头孢氨苄与头孢拉定的线性范围分别为 ~ mg/L 、 ~ mg/L ,检出限分别为 mg/L 、 mg/L 。本方法操作方便,稳定性好, 灵敏度高, 检出限低, 可作为痕量头孢氨苄与头孢拉定的检出分析方法。关键词: β- 环糊精;亚甲基蓝;头孢氨苄;头孢拉定;溴酸钾- 溴化钾;荧光方法头孢菌素类抗生素是一类临床使用极为广泛的广谱抗生素。头孢氨苄(cephalexin, CPX) 和头孢拉定(cephradine, CPD) 同属于第一代头孢菌素类抗生素, 与同类药物相比对革兰氏阳性细菌具有更强的抗菌作用, 且价格较低廉, 故使用更为广泛。对此类头孢菌素的测定已见报道的方法有分光光度法[ 1-3 ] 、荧光法[4-7] 、流动注射化学发光法[ 8-9] 、高效液相色谱法[10] 、电化学分析法[11] 等。但分光光度法的灵敏度不够,高效液相色谱法所需设备较昂贵, 难于普及, 而已报道的荧光法以及化学发光法均需对此类药物先在强酸介质或强碱介质中水浴加热水解 20 min 使其生成荧光产物, 分析过程较长且步骤繁琐。本文基于 Br2 既能氧化头孢菌素, 又能与亚甲基蓝( MB ) 发生氧化反应,使 MB 荧光强度降低, 加入适量的β- 环糊精后,β- 环糊精与 MB 形成包合物,使 MB 荧光强度增至原来的 2 倍,建立了一种简单、快速、灵敏的测定头孢氨苄与头孢拉定的新方法。与文献[4-7] 相比较,本法具有更高的灵敏度和更低的检测限, 而且操作更简单, 已直接应用于头孢氨苄与头孢拉定胶囊中 CPX 和 CPD 含量的测定,结果令人满意。? 基金项目:国家自然科学基金( 20805011 )项目资助作者简介:刘奇(1964 -),男, 河南信阳人, 副教授电子邮箱: E-mail:liuqils518@ 电话: ********** 1 实验部分 仪器与主要试剂 FP-6500 型荧光光谱仪﹙日本 JASCO 公司﹚; UV-1700 紫外可见分光光度计﹙ SHIMADZU ﹚; BS-110S 型电子天平( 北京赛多利斯天平有限公司)。β- 环糊精(国药集团化学试剂有限公司,使用前经沸水重合晶两次, 化学纯): × 10-2 mol/L ;亚甲基蓝(上海试剂三厂): × 10-4 mol/L ; 盐酸:5 mol/L ; KBrO3 ( 上海试剂二厂) -KBr ( 北京化工厂) 标准储备液[12] : 250 mg/L (准确称取 g KBrO3 , g KBr 与 100 mL 容量瓶中,并用二次蒸馏水稀释至刻度), 每次使用前稀释成 25 mg/L 的工作液; 头孢氨苄标准品( CPX , 中国药品生物制品检