微生物大实验土壤中微生物的分离鉴定.docx

土壤中微生物的分离与研究
一、实验目的
学习微生物纯系分离、培养方法。
掌握划线分离纯化微生物的方法。
掌握微生物生理生化反应的研究方法。
了解该菌种的生物学特征。
二、实验原理
土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生锥形瓶中，
加入90ml水，静置30mino
（2） 稀释
将土壤样品10g加入90ml灭菌水中振荡30min,形成土壤悬浊液，取1ml加入装有9ml 灭菌水试管中振荡形成10』稀释，依次将土壤样品稀释IO' IO% IO』、10°。
（3） 涂布
将0、101 10 2 IO% 10\ 10°的稀释样品分别涂布到已制好的固体培养基平板上，每 种涂3个平板。
（4）培养
将平板置于37 C恒温培养三天。
（5）分离
从平板中挑取单个菌落按照下图进行平板划线分离培养，培养1天，共选了 6种菌，1 个霉菌。
（6） 纯化
将划线长出的菌接种于已准备好的固体斜面培养基中，培养1天。
（7） 镜检
对平板中的6种菌分别进行美蓝染色、革兰氏染色、芽抱染色，放在显微镜下观察，并 记录结果。
（8） 保种
将长出菌的斜面放入冰箱中保存。
霉菌的鉴定
配置PNA 土豆培养基，分离纯化后，进行小室培养，然后在显微镜下进行观察，记录形态。
生理生化鉴定
分别配置固体油脂培养基、固体淀粉培养基、葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、蛋白 月东水培养基、葡萄糖蛋白豚水培养基，进行油脂、淀粉分解鉴定，葡萄糖、乳糖发酵鉴定， 以及甲基红、川引噪鉴定。
查伯杰手册
根据菌落形态、染色性质及生理生化性质查分离出的菌为哪几种菌。
五、实验结果及分析

菌种1
菌种2
菌种3
菌种4
菌种5
菌种6
菌 落 描
述
大小
mm



成片

较大
形态
圆形
圆形
圆形
不规则
圆形
不规则
边缘
整齐
整齐
不整齐
不整齐
整齐
不整齐
表面
有隆起
有隆起
有细小颗
粒状突起
光滑
褶皱聚于
一点形成
突起呈白
色
光滑
干湿
干
干
干
有粘性
干
湿
颜色
乳黄色
乳白色
白色略显 透明
白色略显 透明
底部乳白 色
透明略显 青色
芽抱
有，椭圆 形，位于菌 体中部，不
有
有
无
无
无
膨大
菌体形态
短杆状
椭球形成
链，纺锤状
球状成链
单个球体
长杆状
短杆状
革兰氏染 色
阳性
阴性
阴性
阳性
阳性
阴性
运动性
明显
不运动
明显
不运动
明显
明显
淀粉水解
是
是
是
是
是
否
油脂水解
否
否
是
否
是
否
葡产酸
是
是
是
否
是
否
萄产气 糖
否
否
否
否
是
否
乳产酸
否
否
否
否
是
否
糖产气
否
否
否
否
是
否
甲基红
红
黄
红
黄
红
属
芽泡杆菌 属
不确定
梭菌属
消化球菌 属
根瘤菌属
硝化杆菌 属

平板编号
1
2
3
稀释倍数
10-5
每个平板菌落数