旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究.doc

旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究
　　王雪梅张建胜戴云高云涛
　　【摘要】目的研究旱莲草总黄酮的提取及其抗氧化活性。要领使用Fentan反响产生羟自由基·H，光照核黄素产生超氧阴离子自由基-2·，接纳分光光度法研究旱莲草体外扫除倍量的85%的乙醇超声浸提45in，过滤后归并两次滤液，用石油醚萃取两次，取下层液于旋转蒸发仪浓缩至干，称重。将旱莲草总黄酮初提物用甲醇溶解并定溶至100l备用。
　　［7］·L-1pH=，×10-5l·L-1核黄素，·L-1蛋氨酸，×10-5l·L-1氯化硝基四氮唑兰(NBT)。，参加差异浓度的总黄酮提取液〔样品〕，。置于光照箱中光照30in，取出后以缓冲溶液为参比于560n处测定溶液的吸光度。扫除率按下式盘算。A0为空缺管的吸光度。A样为样品管的吸光度。扫除率〔%〕=A0-A样A0×100%
　　·H引发DNA损伤按捺TBA法［10，11］取pH=-，4g·l-，，25l·L-1EDTA-Fe(Ⅱ)，3%〔奇怪配制〕，在37℃，取出参加28%〔/V〕，1%〔/V〕，混匀后置于100℃沸水中加热10in，冷却后于波长532n处测吸光度A样。。用缓冲溶液作参比，按捺率按下式盘算。按捺率〔%〕=A0-A样A0×100%
　　3效果
　　,测定差异浓度的尺度芦丁溶液的吸光度，得到芦丁尺度溶液的尺度曲线，用最小二乘法举行线形回归，得到芦丁溶液浓度Y(g·l-1)与吸光度值X干系曲线的回归方程式：Y=-，其相干系数R2=。由回归方程及样品吸光度盘算出样品中黄酮的含量，%。
　　，在反响体系中参加氯化硝基蓝四哇可天生蓝色物质，当反响体系中参加抗氧化剂时，与NBT反响天生的蓝色物质的量淘汰，因此通过反响体系的吸光度值的变革可测定此化合物的抗氧化活性。旱莲草总黄酮对超氧自由基的扫除作用见图1。实行以芦丁尺度品为比较。由图1可知，随着浓度的增长，扫除作用也随着增大，旱莲草对-2·产生50%扫除效应所需的样品浓度为I50=·l-1〔已换算为总黄酮的质量浓度〕，·l-1时，%。雷同条件下测得芦丁的I50=·l-1，表白旱莲草总黄酮和芦丁对超氧自由基的扫除作用比力靠近。
　　图1对超氧阴离子自由基的扫除作用〔略〕·H的扫除作用旱莲草总黄酮对Fentn反响产生·H的扫除作用见图2。由图2可知，旱莲草总黄酮对·H的I50=·l-1，·l-1时，%。雷同条件下测得芦丁的I50=