《凝集反应实验》.ppt

凝集反应
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抗原抗体反应的类型
1．沉淀反应
√2．凝集反应
3．补体参与的反应
4. 中和反应
5. 免疫标记
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凝集反应
是指颗粒性抗原(红细胞、细菌等)或可溶性抗原（或抗载体颗粒及相应抗原，用于检测标本中是否存在与致敏抗体相同的抗体。
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间接凝集反应的应用
间接凝集反应具有快速、敏感、操作简便、无需特殊的实验设备等特点，而且能用于抗原或抗体的测定，因此在临床检验中广为应用。
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（一）抗原的检测
人绒毛膜促性腺激素
　　检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的间接血凝试验。
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（一）抗体的检测
梅毒抗体
　类风湿因子　RF
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一、 正向间接凝集试验
梅毒快速血浆反应素试验
Rapid Plasma Reagin （RPR）
RPR试验
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感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，
感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出
梅毒的免疫性（一）
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梅毒的免疫性（二）
另一种具有抗体性质的物质叫反应素（reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周产生。经正规治疗后可逐渐消失。
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梅毒感染的实验室诊断
（一）非梅毒螺旋体抗原血清学试验
（二）梅毒螺旋体抗原血清试验
（三） 梅毒确认试验
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非特异性类脂抗体测定
1、性病研究实验室试验（VDRL）
2、不加热血清反应素试验（USR）
3、快速血浆反应素试验 （RPR）
4、甲苯胺红试验（TRUST）
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梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体，其敏感性和特异性均高于非梅毒螺旋体抗原血清试验，但不能用作疗效观察的指标。
1、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）
2、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA)
3、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）
特异性梅毒血清学试验
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梅毒确认试验（三）
1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验
（FTA-ABS）
2、梅毒螺旋体蛋白印迹试验
（western blot test）
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一、梅毒快速血浆反应素试验（RPR）
[实验原理]
梅毒患者血清中存在着能与VDRL(类脂质)抗原发生凝集反应的反应素，本试剂利用这一原理，将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒表面，当待测血清中存在反应素时，即与其发生凝集反应，出现肉眼可见的黑色凝块。
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一、梅毒快速血浆反应素试验（RPR）
[用途]
本方法能快速简单地测定梅毒病人血清中的反应素，可用于梅毒诊断和监测梅毒病人疗效。
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试剂与器材
RPR试剂
梅毒阳性对照
梅毒阴性对照
纸片
专用滴管，针头，橡皮头
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操作方法
。
。
，滴管吸取RPR试剂，分别垂直滴加30微升于上述血清中。
，100转/分钟然后3分钟内在光线充足处判断结果。
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结果判断
（—）：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。
（+——++）：可见较小的黑色凝集物。
（+++——++++）：可见中等或较大的黑色凝块，溶液清亮。
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实验讨论
：在23˚c—29˚c度的环境下进行。
。
。
，具体方法如下：将待检血清用生理盐水作倍比稀释（原血清，1：2，1：4，1：8，1：16，1：32）然后对每个稀释按定性实验方法再进行测定并判断结果。
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实验讨论
，实验呈弱阳性或阳性反应者，需结合临床进行综合分析判断，同时再做特异性密螺旋体实验加以确诊。
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二、间接凝集抑制反应又称为胶乳凝集抑制试验
妊娠试验—HCG测定
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HCG：
人绒毛膜促性腺激素，胎盘合体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素
妊娠4-10周分泌量最大
HCG是一种不随胎盘重量增加而分泌增长的胎