色谱定性定量.ppt

色谱定性与定量方法 ?保留值定性?联机定性?色谱指纹图谱定性?其它定性方法 保留值定性?各物质在一定的色谱条件下均有确定不变的保留值,因此保留值可作为定性指标。?利用纯物质定性?未知物的保留值与某一已知标准物完全相同,两者可能是同一物质。?改变实验条件(色谱柱、流动相),两者保留值仍相同,则可认定两者为同一物质。 4纯物质对照定性?实现方法?利用保留时间和保留体积定性 5 ?用已知物增加峰高法定性当试样组份比较复杂,峰间距离太近,或操作条件不易控制稳定, 很难准确测定其保留值时,可采用此法进行定性 6 ?应用范围:适用于简单混合物,对该样品已有了解并具有纯物质的情况。?优点:应用简便,不需要其他仪器。?缺点:定性结果的可信度不高。 7 ?利用文献中保留值数据进行比对和定性分析时须注意: ?色谱柱填装技术复杂,色谱柱的重现性不甚理想, 即使是同一批号的柱子,重现性也不一致。?因此,文献报导数据仅能作为定性分析参考。?可根据这些数据和对样品的了解选用已知标准物, 再用这些标准物与未知物在同一色谱条件下直接进行比对。 8 ?保留时间结合其它信息定性?二极管阵列检测器(或扫描型紫外检测器)可提供样品的紫外光谱图,可比较标准品与样品之间紫外光谱图来定性。?若标准品与样品保留时间相同,紫外光谱图也一样,则可认定两者为同一物质,若紫外光谱图不同,则两者不是同一物质。 9 联机定性?离线联用方式?在线联用方式 10 ?离线联用?将LC分离后需要定性分析的某些组分分别收集起来,再用“四大谱”或其它定性方法分析?对于仅靠一种仪器定性有困难,需要多种方法综合定性的组分来说,很有必要。?缺点:方法繁琐,费时且容易污染样品。