植物病原线虫的分离方法及形态观察实验.doc

. .
优选
植物病原线虫的别离
一、目的要求
了解从土壤和植物组织中别离线虫的根本原理，掌握从土壤和植物组织中别离线虫的常用方法。学习在解剖镜或扩大镜下用镊子、竹针、毛针、毛笔等工具从水中和滤能在水中漂浮，需用比重小于1的溶剂。
五、所需时间流程
1．漏斗别离样品浸泡放出水浸液、离心镜检
2．培育别离样品培育过筛、收集、镜检
3．浅盘别离样品浸泡样过筛、收入记数皿、镜检
4．漂浮别离 10 min左右。
六、实验作业
比较各种线虫别离方法的优缺点。
一、目的和要求
识别主要植物线虫病的病症和病原线虫的形态特征。包括雌雄同型及异型线虫.
二、材料和用具
草莓芽干尖线虫〔Aphelenchoides besseyi〕或珠蓝线虫；小麦粒线虫〔Anguina tritici〕，破坏性茎线虫〔Ditylenchus destructor〕，寄主甘薯，南方根结线虫〔Meleidogyne arenaria〕，寄主花生等；大豆胞囊线虫〔Heterodera glycines〕；长针线虫(Longidorus sp.〕；毛刺线虫〔Trichodorus sp.〕。寄生性线虫病的危害状标本或幻灯片。线虫的固定液有多种，常用的有FA、FAA和TAF等三种：〔1〕FA液：福尔马林〔36％甲醛〕10ml，蒸馏水90ml；〔2〕FAA液：福尔马林10ml，冰醋酸1ml，蒸馏水89ml，〔3〕TAF液：三羟基乙胺2mi，福尔马林7m1，蒸馏水91ml。
. .
优选
三、容与方法
1 线虫形态的观察
〔1〕粒线虫属〔Anguina〕观察由小麦粒线虫危害小麦引起的病症，注意小麦受害部位，，用刀片切开或挑针挑破，挑取虫瘿部的白色棉絮状物于载玻片上的水滴中盖上盖玻片，置于低倍镜下镜检，可见到成虫、卵和幼虫。雌虫、雄虫均为线形，雌虫体形较雄虫粗大，往往卷曲，体的卵巢顶端弯曲。雄虫昆部有交合刺，交合伞几乎包到尾尖。〔2〕茎线虫属〔Ditylenchus〕观察甘薯茎线虫〔D．destructor〕危害甘薯的病症，剖开病薯可见到条点状褐色或白粉干腐病症，挑取少量组织于载玻片的水滴中，加盖玻片镜检，可见到卵、幼虫、成虫等各个虫态。甘薯茎线虫雌雄同型，都是线形，雌虫稍粗大，尾端尖细。注意口针、食道球形态，肠和卵巢平行，单卵巢，卵单行排列。雄虫较细小，尾部可见交合刺、交合伞，交合伞后端距虫体末端有一定间隔。因虫体很小，观察部器官需用高倍镜。观察示镜下的雄虫尾部形态。〔3〕滑刃线虫属〔Aphelenchoides〕有各种危害状，例如水稻(Rice)干尖线虫〔A．besseyi〕引起水稻(Rice)干尖线虫病，以剑叶的干尖最明显，剑叶尖端2－6厘米一段变为白色。枯槁卷缩，幼穗形成时线虫侵入颖壳，引起秕粒或不很充实；菊叶线虫〔〕为害菊的叶片，使叶片组织坏死。镜检水稻(Rice)干尖线虫或珠蓝线虫，观察口针、食道球的形态特征、雄虫尾部的交合刺，有无交合伞.〔4〕胞囊线虫属〔Heterodera〕观察大豆胞囊线虫〔H．glycines〕的危害病症。挑取病根上的雌虫，肉眼可见到线虫头部已钻入寄主组织，虫体