高效液相色谱法测定银芍颗粒中绿原酸的含量
【摘要】目的建立银芍颗粒中绿原酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定该药中绿原酸的含量,色谱条件:AgilentZBAXSB-18(250×,5μ)色谱柱,乙腈-%磷酸水溶液子分析天平〔d=,瑞士〕;AgilentZBAXSB-18(250×,5μ)色谱柱。
绿原酸对照品〔中国药品生物制品检定所提供,批号110753-202213〕;银芍颗粒(银芍颗粒由华中科技大学协和医院药剂科自制,批号20221105,20221107,20221108,20221110,20221112)。乙腈〔色谱纯,上海凌峰化学试剂〕,磷酸〔色谱纯,上海凌峰化学试剂〕,水为双蒸水,其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
AgilentZBAXSB-18(250×,5μ)色谱柱;流动相为乙腈-%磷酸水溶液〔9∶91〕(V/V);检测波长为327n;·in-1;进样量10μl;柱温为30℃;理论板数按绿原酸峰计算,应不低于5000。
精细称取经五氧化二磷减压枯燥器中枯燥的绿原酸对照品适量,置1l棕色容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,。
取银芍颗粒适量,研细,,精细称定,置棕色具塞锥形瓶中,精细参加50%甲醇50l,密塞,放置15in,取续滤液,置棕色具塞锥形瓶中,即得。
按处方比例和工艺,制成不含金银花药材的阴性样品,按“供试品溶液的制备〞制备方法,同法制成阴性对照溶液。
分别精细汲取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图(见图1~3〕。结果说明,供试品色谱图中,在与对照品色谱峰相应的位置上有一样的色谱峰,主峰与其它色谱峰到达基线别离,阴性对照无干扰。
,,,,,依次注入液相色谱仪中,按上述色谱条件测定,以进样量为横坐标,相应的峰面积值为纵坐标,计算得线性回归方程为:Y=+,r=。结果说明,~。
精细汲取对照品溶液10μl,按上述色谱条件注入液相色谱仪,连续进样5次,,,,,。%,说明仪器性能良好。
取同一供试品溶液按上述色谱条件,于0,3,6,9,12,24h按上述色谱条件各进样1次,测定峰面积,,,,,,。%,说明测定时间内供试品稳定。(批号20221105)共5份,按含量测定项下的方法制备供试品溶液,
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