高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量.doc

高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量.doc高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量作者:李越峰,杨武亮,沈菲,严兴科,李廷利【摘要】目的采用高效液相色谱( HPLC )法测定不同白芍药材中芍药苷含量,确定哪种白芍含芍药苷最高。方法采用色谱柱: Hypersil C18 柱( mm × 200 mm ,5μm );流动相:乙腈- % 磷酸水( 14: 86 );检测: UV 230 nm ;流速: ml/min ; 柱温: 25℃。结果 2 年生、 10 月份采收贮存期短的亳州白芍芍药苷含量最高。结论该方法简便准确可靠、重复性好。【关键词】白芍芍药苷高效液相色谱质量 Abstract:ObjectiveTo pare the quality of different Radix Raeoniae Alba ethods. MethodsThe separation n( mm × 200 mm , 5μ m ); the mobile phase ml/min ; the column temperature e harvested in October method is simple, rapid g 的溶液,摇匀,即得。 供试品溶液的制备精密称取本品干燥的粉末 g ,置 50 ml 容量瓶中,精密加入 50% 乙醇 35 ml ,超声提取 30 min ,冷却,加 50% 乙醇至刻度,摇匀,滤过,再过 μm 滤膜,取续滤液作为供试品溶液。 色谱条件色谱柱: Hypersil C18 柱( mm × 200 mm , 5μ m )(大连 Elite 公司);流动相:乙腈-% 磷酸水( 14∶ 86 );检测: UV 230 nm ;流速: ml/min ;柱温: 25℃。理论塔板数以芍药苷峰计算不得低于 2 000 。在上述色谱条件下,取对照品溶液、供试品溶液各进样 10μl 进行 HPLC 测定,结果见图 1~2 。由图中可见供试品中芍药苷与芍药苷对照品峰保留时间一致,并且与样品中其它组分达到了很好的分离。 线性关系考察精密称取芍药苷对照品 80g ,置 50 ml 容量瓶中,加稀乙醇稀释至刻度,即得到 mg/ml 的芍药苷对照品溶液,从中分别精密吸取 , , , , 和 ml 的对照品溶液, 分别置 6个 25 ml 的容量瓶中,用稀乙醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。分别精密吸取上述对照品溶液各 10μl ,绘制标准曲线,得回归方程 Y=1 4X+ 5, r= 99。 提取方法的确定本实验对提取溶剂、提取溶剂的浓度、提取时间、提取方法等进行综合考察,最后确定供试品溶液的制备方法为:用 50% 乙醇超声提取 30 min 即可。 精密度实验精密吸取同一份供试品溶液 10μl ,重复进样 6 次,测定芍