培养基母液的配制方法.docx

培养基母液的配制方法
、实验目的
了解无菌操作
掌握培养基母液的配制方法
二、实验原理
配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制， 即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分 别先配制成一系列培养基母液的配制方法
、实验目的
了解无菌操作
掌握培养基母液的配制方法
二、实验原理
配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制， 即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分 别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进 行稀释配制即可。
三、实验器材和药品
器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。药
品：NH4N03、KN03、CaCl2 ・2H20、MgS04 ・7H20、KH2P04、KI、H3B03、
MnS04 4H2O> ZnSO4 ・7H20、Na2Mo04 ・2H20、CuSO4 «5H20、CoCl2 «6H20、
FeSO4・7H20、Na2-EDTA・2H20、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇（维生素
B6）、盐酸硫胺素（维生素B1）、甘氨酸。
四、实验步骤 1、大量元素母液的配制
各成分按照表1 培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分 别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到 1000ml 的容量瓶中 即为 10倍的大量元素母液。到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表 1 MS 培养基大量元素母液制备
序号
药品名称
培养基浓度
(mg/L)
扩大10称量
(mg)
1
NHNO
4 3
1650
16500
2
KNO
3
1900
19000
3
CaCl ・ 2H O
2 2
440
4400
4
MgSO ・ 7H O
4 2
370
3700
5
KH PO
2 4
170
1700
注意：
配制大量元素母液时，某些无机成分如 Ca2+、SO42－、Mg 2+和 H2PO4 一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发 生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分 析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合
混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、S042 —、Mg 2十和H2P04 一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
CaCl2 ・2H20要在最后单独加入，在溶解CaCl2・2H20时，蒸馏 水需加热沸腾，除去水中的CO2,以防沉淀。另外，CaCl2 ・2H20放 入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。
2、微量元素母液的配制
MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物(除Fe )组成。微量元素 用量较少，特别是CuS04・5H20、CoCl2・6H20，因此在配制中分 微量1、11配制。按照表2,表3配方，用电光天平称量，其它同大 量元素。配制培养基时，每配制1L培养基，取微量I10ml，微量II 。
表2 MS培养基微量I的配制
序号
化合物名称
培养基浓度
(mg/L)
扩大100倍称量
(mg)
1
MnSO ・ 4H O
4 2

2230
2
ZnSO ・