八)尿素(脲)抑制蔗糖酶的实验 抑制剂与酶的活性部位结合,改变了酶活性部位的结构或性质,引起酶活力下降。根据 抑制剂与酶给合的特点可分为可逆与不可逆抑制剂。可逆抑制剂与酶是通过共价健结合,不 能用透析等物理方法解除。这二种抑制剂类型可以通八)尿素(脲)抑制蔗糖酶的实验 抑制剂与酶的活性部位结合,改变了酶活性部位的结构或性质,引起酶活力下降。根据 抑制剂与酶给合的特点可分为可逆与不可逆抑制剂。可逆抑制剂与酶是通过共价健结合,不 能用透析等物理方法解除。这二种抑制剂类型可以通过实验进行判断。实验方法为:在固定 抑制浓度的情况下,用一系列不同浓度的酶与抑制剂结合,并测定反应速度。以反应速度对 酶浓度作图,根据曲线的特征即可判断之。 在可逆抑制类型中可分为竞争性抑制,非竞争性抑制和反竞争性抑制三种: 竞争性抑制: 在竞争性抑制中,酶既可以与底物结合,又可以与抑制剂结合,但却不能与二者同时结 合,即有ES和EI,而不存在ESI。其动力学特征是表观值K '增加,而最大反应速度V 不 m max V max[S ] I [I] K (1 + ) + [ S} mK 变,公式为: K' = K (1 + 辺) mmK 表观米氏常数Km'为: 已知抑制剂浓度[I],由斜率计算出抑制剂常数K[,即可算出表观米氏常数Km'o 非竞争性抑制: 在非竞争性抑制中,酶可以与底物和抑制剂同时结合,形成EIS,但EIS不能进一步转 变为产物。其动力学特征是V max 降低而Km不变,公式为: V max[S] V = max^ '(1 + 凶)(K + [ S ]) Km V' — max max [ J ] 1+— KI 表观最大反应速度V '为: max 已知[I],由斜率计算出K],即可计算出表观V '