阎-实验六-生理生化.ppt

(一)化学因素对微生物生长的影响
(二)细菌的生理生化反应
实验六
实验目的:
了解常用化学消毒剂对微生物的作用
实验一化学因素对微生物生长的影响
常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类、有机溶剂(酚、醇、醛等)、卤族元素及其化合物、染色剂和表面活性剂等。
实验原理:
1 氧化剂:通过强烈的氧化作用杀死微生物。
碘的杀菌力强,3-7%碘溶于70-83%的乙醇中成碘酒。
2 重金属盐类:使蛋白质变性、沉淀,使酶失活。 0·02-0·2%HgCl2(升汞)溶液对大多数细菌有致死作用。
3 有机溶剂:使蛋白质及核酸变性、破坏细胞膜透性,抑制脱氢酶,氧化酶活性。
乙醇(70%)
4 表面活性剂:具有降低表面张力效应的物质,可抑菌或杀菌。
甲酚杀菌力最强
煤酚皂液(来苏尔)为甲酚和肥皂的混合液。
新洁尔灭:破坏细胞的渗透性
实验材料
1 菌种:
大肠杆菌
2 培养基:
牛肉膏蛋白胨培养基
3 消毒剂:
%碘酒,%石碳酸,75%乙醇, 100%乙醇,1%来苏尔, %新洁尔灭,无菌生理盐水
实验步骤
1 倒牛肉膏蛋白胨平板
2 ,涂布均匀。
3 将平板(皿底)划分为6等份,分别将浸有各种消毒剂的小圆滤纸片贴在平板的每一等份中。
4 将贴好滤纸片的含菌平板,置37℃倒置培养24-48h。
5 测量并记录抑菌圈的直径,根据其直径的大小,可初步确定测试药品的抑菌效能。(自带尺子)
实验结果
思考题书p97思考题第11题
消毒剂
抑(杀)菌圈直径/mm
消毒剂
抑(杀)菌圈直径/mm
%碘酒
5%石炭酸(苯酚)
100%乙醇
1%来苏尔
75%乙醇
%新洁尔灭
实验二:细菌的生理生化反应
(IMViC 与硫化氢试验)
吲哚(I)、甲基红(M)、(Vi)、柠檬酸盐利用(C)试验。用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。
实验目的:
1 学习几种主要微生物的生理代谢试验及检验方法
认识微生物代谢类型的多样性。
2 了解IMViC反应在肠道菌鉴定中的意义和方法
实验原理:
1 吲哚试验: 用来检测吲哚的产生,有些细菌能产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙氨酸。
吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛红色的玫瑰吲哚
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚

吲哚试剂