微藻提脂及脂肪酸测定.docx

微藻提脂
甲醇(CH30H)氯仿(CHC13)溶液：甲醇-氯仿(2： 1/V： V)
溶液的配制：1 %氯化钠溶液：称取1g氯化钠溶解到蒸馏水定容至100ml；
操作步骤：
冷冻干燥获得干藻粉，放入粉碎机中粉碎待用。采用液氮研磨法，微藻提脂
甲醇(CH30H)氯仿(CHC13)溶液：甲醇-氯仿(2： 1/V： V)
溶液的配制：1 %氯化钠溶液：称取1g氯化钠溶解到蒸馏水定容至100ml；
操作步骤：
冷冻干燥获得干藻粉，放入粉碎机中粉碎待用。采用液氮研磨法，准确称取粉碎的 (m),放入研钵中，加入液氮反复研磨。
-氯仿(2： 1, V： V)提取，超声5min混匀，离心分离15min后，残渣 -氯仿(2： 1，V： V)，离心分离，保留有机相；残渣再加1. 仿(2： l，V： V)，离心分离，保留有机相，一共重复2次。
合并有机相提取液转移到分液漏斗中，加入2. 5ml氯仿和3. 0 ml 1%氯化钠溶液， 混匀，静置分层，回收下层。、中层溶液中再萃取一次，合并下 层液；再加2. 5ml氯仿于原上、中层溶液中再萃取一次。
合并下层液，置于提脂瓶中(m1)，50° C氮气挥干溶剂至恒重，于天平称量得到微藻 总脂和提脂瓶的总重量(m2)
W=(m2-m1)/m *100%
W 脂类质量分数，％；
m 试样质量，g;
ml 一提脂瓶质量，g;
m2…一……一提脂瓶与样品所含总脂质量，g。
脂肪酸测定
所需试剂（色谱级）:a：正己烷（C6H14）； （CHC13）； （CH30H）。
所需药品：（分析级）:：400°C烘烧4 h,冷却后置于干燥器中，待用；
氢氧化钾（KOH）； （HC1）； （NaCl）。
所需标准品:（内标）；（外标）
溶液的配制：
/ L氢氧化钾甲醇溶液的配制：将2. 24g氢氧化钾溶解到100mL甲醇
盐酸-甲醇（V： V=l： 9）溶液的配制，100mL
内标溶液的配制： mg十九碳酸于10 ml容量瓶中，用正己烷稀释至刻度；
氯化钠饱和溶液的配制：将过量氯化钠溶解到