用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株.doc

用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株.doc用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株
【摘要】用紫外线对吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)NP03进行诱变,再采用庆大霉素抗性筛选法进行处理,剂量分别为0、、、,共获得113株抗性突变株,其中西罗莫司产量高于出发菌株的有51株,突变株NP0374#的生产能力达到出发菌株的134%,且遗传特性稳定。
【关键词】西罗莫司; 庆大霉素; 抗性筛选; 遗传稳定性
Screening of mutant overproducing sirolimus icin resistance method
Zhang Li and Jia Xiaojing
(Neent Center, North China Pharmaceulical Co., Shijiazhuang 050015)
ABSTRACT After the spores of Streptomyces hygroscopicus NP03 bEing treated utagen one hundred thirteen sirolimusproducing strains icin resistance screening. The treatment dose g respectively. The sirolimus yields of 51 mutants ong them, the yield of #NP0374 us; Gentamicin; Resistance screening; Hereditary stability
免疫抑制剂在器官移植排斥反应的预防和治疗中有极其重要的作用。自20世纪70年代环孢素A用于临床以来,器官移植的成功率大大提高,但探求新的、安全有效的免疫抑制剂的工作一直在继续。
西罗莫司(sirolimus)是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的大环内酯类抗生素,1977年Morris等首先发现其具有免疫抑制作用,1989年开始把西罗莫司作为治疗器官移植的排斥反应的新药进行使用,临床应用显示它具有很好的抗排斥作用,与环孢菌素A和他克莫司(FK506)等免疫抑制有良好的协同作用,是一种疗效好、低毒、无肾毒性的新型免疫抑制剂[1,2]。西罗莫司除用于器官移植抗排斥药物外,还可用于抗真菌、心血管支架涂料、I779的原料药,预防和治疗系统性红斑狼疮、胰岛素依赖型糖尿病等,应用前途广泛。
本文报道用庆大霉素对西罗莫司产生菌进行处理,以获得高产的抗性菌株。
1 材料与方法
出发菌株
吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)NP03(本实验室保存)。
培养基
分离培养基(%) ,,,。
斜面培养基天门冬素琼脂培养基。
种子培养基(%) ,,,;pH 自然。
发酵培养基(%) ,,,,;pH自然。
主要仪器
旋转式摇瓶机,高速离心机,l。
(2)诱变处理
紫外线诱变将其孢