传递窗紫外灯表面消毒效果验证.docx

公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]
传递窗紫外灯表面消毒效果验证
在洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行，全过程严格遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
每次操作开始前，开紫外灯照射1小时。
培养基的制备
营养琼脂培养基
配方：
营养琼脂培养基粉
纯化水 1000ml
配制：
根据需要量称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。
改良马丁琼脂培养基
配方：
改良马丁琼脂培养基粉
纯化水 1000ml
配制：
根据需要量称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。
营养肉汤培养基
配方：
营养肉汤培养基 20g
纯化水 1000ml
配制：
称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。
改良马丁培养基
配方：
改良马丁培养基粉
纯化水 1000ml
配制：
根据需要量称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。
方法验证试验
辐照强度测定
开启紫外灯5min后，用中心波长为的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直1m的中心处测量其辐照度值（uW/cm2）。
测量时，电压应稳定在220V。
普通型或低臭氧型直管紫外线灯（30W），在灯管下方垂直1m的中心处，新灯管的辐照度值应≥90 uW/cm2 。使用中的灯管的辐照度值应≥70 uW/cm2 ，低于此值者应予更换。
照射剂量
表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，照射剂量应达到×103 uW·s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到×104uW·s/cm2。
照射剂量计算：
照射剂量（uW·s/cm2 ）＝紫外灯管强度（uW/cm2）×时间（s）
细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定
菌液的制备
接种菌种名称
接种培养基
培养条件
金黄色葡萄球菌新鲜培养物
营养肉汤培养基
30～35℃培养18～24小时
大肠杆菌新鲜培养物
枯草芽孢杆菌新鲜培养物
白色念珠菌新鲜培养物
改良马丁培养基
23～28℃培养24～48小时
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌培养后，将菌液进行活菌计数。
将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注定量菌悬液，（载体回收菌量达5×105～5×106 cf