革兰氏染色.docx

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师
Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后，用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G：苯胺兰1g；35％或95％酒精100ml
间苯三酚(phloroglucin)溶液用于测定木质素。
配方：间苯三酚5g；95%酒精100ml
注：此溶液呈黄褐色即失效。
橘红G(orangeG)酒精溶液为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。
配方：橘红G1g；95%酒精100ml
番红(safraninO)为碱性染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红G、结晶紫作三重染色。
配方：(1)；蒸馏水100ml
(2)；50%(或95%)酒精100ml
(3)苯胺番红酒精染色液
甲液番红5g+95%酒精50ml
乙液苯胺油20ml+蒸馏水450ml将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。
固绿(fastgreen)又称快绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。
配方：(1)；95%酒精100ml
(2)苯胺固绿酒精液固绿1g；无水酒精100ml；苯胺油4ml配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。
苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料，是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液，又称铁矶苏木精染色液。
配方：甲液(媒染剂)：硫酸铁铵(铁明矶)2-4g；蒸馏水100ml(必须保持新鲜，最好临用之前配制)
乙液(染色剂)：-1g；95%酒精10ml；蒸馏水90ml配制步骤：(1)将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期保存。
切片需先经甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
亚甲基蓝染液常用于细菌、活体细胞等的染色。
，溶于100ml蒸馏水中即成。
詹纳斯绿B(JanusgreenB)染液
，配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。
硫堇染液
(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。使用此液时，需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能成多色反应。
黑色素液
水溶性黑素10g，蒸馏水lOOmL，甲醛(福尔马林)。可用作荚膜的背景染色。
墨汁染色液国产绘图墨汁40mL，甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背景染色。
吕氏(Loeffier)美蓝染色液