化妆品微生物指标检验.ppt

化妆品微生物指标检验
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汇报人：
工作部门：
化妆品因含有水分，油脂，蛋白质，多元醇等，为微生物的生化妆品微生物指标检验
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汇报人：
工作部门：
化妆品因含有水分，油脂，蛋白质，多元醇等，为微生物的生长创造了良好的条件，造成产品变质。
为了抑制微生物的繁殖和消费者使用过程中的产品污染，往往在化妆品中加入防腐剂，但不能过量。
因此，化妆品一方面为微生物的生长繁殖提供了良好的环境；另一方面由于防腐剂的应用又可抑制微生物的生长。
化妆品卫生标准
微生物检验方法
GB/T -1987 化妆品微生物标准检验方法 总则
菌落总数 （化妆品卫生规范-2019年）
GB/T -1987 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定
粪大肠菌群：GB/T -1987 化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群
铜绿假单胞菌 （化妆品卫生规范-2019年）
GB/T -1987 化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌
金黄色葡萄球菌 GB/T -1987 化妆品微生物标准检验方法 金黄色葡萄球菌
霉菌和酵母菌：（化妆品卫生规范-2019年）
总则
微生物检验的基本要求
微生物检验样品的采集、保存及制备
适用范围
总则
1、具有代表性
随机抽取相应数量的包装单位。
应从批的整体中各部位抽取，如从四角+中间；分上、中、下层；或上、中上、中、中下、下层；梅花点式等。
所有接触样品的工具、容器都必须保持清洁。
样品的采集
2、抽/采样数量
按照抽样批及抽样方案
JJF1070－2019 定量包装商品净含量计量检验规则
3、检验量
检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。
样品的制备
液体样品
膏、霜、乳剂半固体状样品
固体样品
样品的制备注意事项
无菌容器、材料及操作
样品的均一性
为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL ％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方法的有效性。
粪大肠菌群
粪大肠菌群（Fecal coliforms）系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在 ℃±℃培养 24h～48h 能发酵乳糖产酸并产气。
该菌直接来自粪便，是重要的卫生指示菌。
产酸：黄色
产气：气泡
产酸产气
书写检验
记录单
不产酸不产气
增菌培养
供试液的制备
配培养基和稀释液
检查结果判断
44 ±℃
24~28h
分离培养
蛋白胨水培养
最终结果判断
44 ±℃
24±2h
靛基质
特征菌落
36±1 ℃
18~24h
双倍胆盐乳糖M
EMB琼脂
液面玫瑰红色
紫黑色
★粪大肠菌群检查流程图
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在 42℃±1℃条件下能生长。
该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。
最终结果判断
增菌培养
供试液的制备
书写检验
记录单
分离纯化
无菌落或无特征菌落
配培养基和稀释液
革兰染色、镜检→
氧化酶试验
绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验
42℃生长试验
明胶液化试验
★铜绿假单胞菌检查流程图
SCDLP培养基
十六烷三甲基溴化铵琼脂
36±1℃
18~24h
36±1℃
18~24h
特征菌落
灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素
十六烷三甲基溴化铵平板
SCDLP培养基
黄绿色菌膜
灰白色湿润
氧化酶试验
粉红/紫红色