脲酶试验标准操作规程.doc

脲酶试验标准操作规程
1．目的
规范脲酶试验标准操作规程。
2．原理
某些细菌具有脲酶，能分解尿素生成氨，使培养基变碱，酚红指示剂随之变红色。
3．试剂
尿素氮培养基成分
蛋白胨
1．目的
规范脲酶试验标准操作规程。
2．原理
某些细菌具有脲酶，能分解尿素生成氨，使培养基变碱，酚红指示剂随之变红色。
3．试剂
尿素氮培养基成分
蛋白胨 氯化钠
葡萄糖 磷酸二氢钾
％酚红溶液 琼脂 18～20g
20％尿素溶液 100 ml 蒸馏水 1000ml
PH
制备 将上述成分(除酚红、尿素外)混合于蒸馏水中，加热溶解，校正PH，加入酚红溶液，分装每瓶100ml，置120℃灭菌15分钟备用。临用时，加热溶解，冷却至55℃左右，加入无菌的尿素溶液10ml，摇匀，无菌分装于灭菌试管，每支2ml，并置成斜面备用。
4．质控
大肠埃希菌ACTT 25922为阴性，奇异变形杆菌ACTT 49005为阳性。

将待检菌接种至含尿素培养基中，35℃孵育1～4日。

红色者为阳性。

所有尿素培养基均依靠出现碱性来证实，故对脲酶不是特异性的。某些细菌如铜绿假单胞菌利用培养基的蛋白胨可分解为多量氨基酸，使PH升高呈碱性，造成假阳性。因此必须用无尿素的相同培养基作为对照。

主要应用于肠杆菌科中的变形杆菌属细菌的鉴别。奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。