牛分枝杆菌TB10.4重组蛋白的克隆表达及生物活性研究.pdf

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⋯:侔吻研究生弥南勿乃缸帆缈晔垲时间:Γ年厶喇毛红关于论文使用授权的声明独创性声明时问:ǎ本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。年明确的说明并表示了谢意。
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尔量..、.⒃靥灞昵┑跋、篍重组蛋白团摘要且恢址浅V匾5娜诵蠊不即静。饕S膳7种Ω司给人。牛结核病的防治和彻底根除需要灵敏、有效的诊断方法,目前广泛应用的皮内变态反应试检测的特异性,寻找娲碳ぴ吹难芯砍晌A巳鹊悖ü冉现虏⌒苑种Ω艘窈头侵虏⌒苑枝杆菌基因组,人们发现区基因存在差异,因此区蛋白有望替代糜谇种虏⌒苑枝杆菌与非致病性分枝杆菌感染。起始终止密码子的颋疪鹗贾罩姑苈胱拥腜引物/,以牛分枝杆菌和中,⒅罩姑苈胱、、终止密码子蚿..鹗肌⒅罩姑苈胱,狿峁允緍.、分别通过甕释放试验、荧光定量匝楹碗嗍笃な允匝槎址椒ḿ觳釺重组蛋白的赴钚浴J紫雀軵皮试试验和故头攀匝筛选出放7种Ω菌感染牛和方】蹬!本猜霾杉#嗡乜鼓肿坝紫赴嘌逯校缘饶魑4碳ぴ矗媾嘌笥肂牛结核分枝杆菌检测试剂盒在蛋白水量一.、—、团刺激詐蛭D诓危琍刺激样品为对照,荧光定量觳釯B妓健用灭活的牛分枝杆菌致敏豚鼠,致敏后天分别以..,.、芭进行单个重组蛋白的皮试试验,及以::疋.:妃进行重组蛋白与戎柿勘然旌虾蟮钠な允匝椋诖碳的皮肤肿胀部位直径。试验结果表明:重组蛋白能刺激的转录和表达,因此在故头攀匝榻碛凶魑[蹺补充候选抗原的能力:在皮内变态反应试验中,.,结果显示..、.综上所述,,可以通过吸入含菌的气溶胶或食用未经消毒的牛奶传染验和丫释放试验均依赖于魑4碳ぴ矗嬖诩觳馓匾煨圆桓叩娜毕荨=,〉皆吮泶镌靥錺以可溶性表达,.园逍问奖泶铮笮》直鹞和,与理论值相符。用对可溶性蛋白纯化,用尿素对包涵体蛋白进行洗涤变性复性处理,得到纯度超过%的.、.刈榈鞍住平检测沟谋泶锼健蘧杉嗡乜鼓#掷肱M庵苎A馨拖赴玫饶Χ琓ㄌ崛直鸩饬扛骷觳獾白单独使用时无明显反应,与旌嫌τ檬保反应,表明在皮内变态反应时,可能需要几种或多种蛋白的协同作用。,其中一姆从υ宰詈谩、
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