凝血酶原时间(PT)测定.docx

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凝血酶原时间(PT)测定
(分析仪器法)
某某人民医院检验科临检室
凝血酶原时间(PT)测定
(分析仪器法)
编号:
版本:1页数:共5页
实验原理:凝固法
确定量的血浆(50微升)样本经一定时间加温后,加入PT试剂,采用波长660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
(空腹12小时左右),静脉采血。
%(w/v)+,混匀。
3标本存放
1小时内(3000r/minX15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2〜8°C保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70C不超过6个月),只能冻融1次,在37C迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
标本运输:低温条件下运输。
标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
实验材料:
,每瓶加4ml蒸馏水溶解(40人份),未开封试剂2〜8C贮存到说明书上有效期,复溶试剂2〜8C保存不超过5天。
,才能使用或分装。复溶后,室温保存2小时,2〜8C4小时。
仪器设备:
:SysmexCA-1500全自动血液凝固分析仪
:日本Sysmex公司
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:SysmexCAT500
:
:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时
:36个,具冷藏功能。
:50个,可自动连续添加。
:
:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)
操作步骤:
:
,清空反应杯抛弃槽。
(不能超出警告线)。,清洗用蒸馏水等。

先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“NotReady”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。
:
从主菜单选WorkList—出现第一架样本工作清单输入画面,选|IDNOEntry输入第一个样本号一按相应实验项目名称键PT,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”,可按profile#1|组合选项选择,选中项目相应位置标记为“o”,选完项目后按ENTER确认,要删除某项目时只需按该项目(按键如PT◎变为匡)即可,一用键,同样输入其他标本编号项目。(快速输入可用Repeat键,输入重复标本数,复制同样项目的输入。

,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本)
|键开始测定.
盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按Start键,进样开始,一测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为
4
“◎”,,,继续输入其他架样本工作清单,按Rigester,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,一测定完成,测定项目背景变为
“•”,打印机打印出测定结果,所有测定清单完成,系统恢复'Ready”状态。
每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。
冲冼针RinseProbe
,和已使用过的反应杯。。
关机:先关主机,再关打印机。
:
-600秒,测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动度、INR值等参数。若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:***.*出现错误,不能得到分析数据
不能计算参数
+++.+数值超出线性范围.
-14秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:
*出现错误信息
<数据低于可报告的低限
>数据高于可报告的高限
:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。
11临床意义:PT是用于筛查外源性凝血系统(II、V、W、X)及口服抗凝药物剂量(如华发令、双香豆素等)的检测项目。
:秒数S:10-14S(患者结果超过正常对照35以上有临床意义)活动度:80-120%
国际标准化比值INR:-
PT延长见于先天性凝血因子II、V、W、X缺乏;低(无)纤维蛋白原血症;获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质(如口服抗凝剂、肝素)。
PT缩短:见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态(DIC早期、急性心肌硬塞等)、血栓性疾病(脑血栓形成、急性血栓性静脉炎)、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后。
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监测口服抗凝药(如华发令、双香豆素等)的重要指标。一般要求:PT(S):18-24SINR:-,不同疾病不同值。
12变异的潜在来源
:草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查
,如血与抗凝剂未充分混匀,出现凝块,混匀时过分用力,使标本溶血,造成结果变异。
,如双香豆素、链激酶、尿酶等。。
FDP增加使凝固时间延长。
,如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。
操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解
确认溶剂类型,一般溶解液包括:蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液,必须按说明书要求使用。
溶解时,轻轻转动容器,保证干粉完全溶解,避免剧烈振荡。
复溶后,室温放置5-10分钟方可使用。
仪器维护与保养
日常维护()
每周维护
:仪器在"Ready”犬态下,从主菜单按SpecialMenuf按Maintainf按Rinse&Preparef按Execute键运行此程序f完成后按Return返回。
清洁仪器:定期用擦布擦干净仪器内外,包括试剂槽。
需要时维护:
14・3・1调整压力:仪器在"Ready"状态下,以主菜单按SpecialMenuf按Maintainf按PressureAdjust键,显示压力是否在其调整范围内?若不在’则打开仪器右侧相应压力调整旋钮,旋动调整好压力,再锁紧旋钮。
:关机f从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖f换上好的灯泡f装上内外盖f从主菜单按〔SpecialMenuf再按Maintainf按Caliblampf确认关上遮光盖,按Execute|运行调整程序。
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:关机f从仪器左侧旋下保险盖f更换上好的保险管f装上保险管盖。
参考文献
《全国临床检验操作规程》第三版,东南大学出版社.
Sysmex公司《SysmexCA-1500操作手册》.
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生效日期
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批准日期: