克伦特罗说明书一步法.doc

克伦特罗说明书一步法
盐酸克伦特罗酶联免疫检测试剂盒使用说明书
一、概要
克伦特罗(clenbμterol,CLE)是一种-肾上腺受体激动剂,此类药品在临床上用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。因为该药可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后,残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状,对消费者的健康造成极大危害。我国农业部第235号文件规定不得检出。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测出尿样、肌肉、肝脏及饲料等中的克伦特罗。二、测定原理
本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗克伦特罗抗体。检测时,加入标准品或样品溶液及克伦特罗酶结合物,他们竞争性地与克伦特罗抗体结合,形成抗原抗体复合物;用TMB底物显色;加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的克伦特罗浓度与吸收光强度成反比。三、试剂盒组成
酶标板1块(包被抗克伦特罗抗体)
标准液6瓶(1ml/瓶):0、、、、、。酶结合物…………………………7ml 显色剂
A …………………………7ml 显色剂B …………………………7ml 终止液…………………………7ml 10×浓缩洗涤液…………………50ml 说明书……………………………1份四、需要但试剂盒中不提供的器材和试剂(1)设备
……微孔板酶标仪(450nm) ……振荡器……离心机
……微量移液器:20μl~200μl,100μl~1000μl ……容量瓶:100ml,500ml,1000ml (2)试剂……三氯乙酸……氢氧化钠
……叔丁基甲醚色谱级……浓 HCl ……氯仿
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2010-01版
……磷酸……Tris ……乙酸乙酯……乙腈
五、样本前处理步骤样本处理前须知
处理任何样本时,都须注意:
(1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更
换吸头。
(2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净
实验器具,以避免污染干扰实验结果。
样本前处理需配制:
配液1:3%的三氯乙酸溶液
。
配液2:1M盐酸溶液
。
配液3:1M氢氧化钠溶液
,定容至100ml。
配液4:
,定容至100ml。或者从1M的盐酸溶液中取5ml,然后加入去离子水定容至100ml。
配液5:
,定容至100ml。样本处理步骤:
(1)尿样
尿样直接测定,若尿样呈浑浊状,4000转/分钟离心10分钟后取上清部分(清亮部分)用于检测。注:稀释倍数为1倍。
(2)带有低脂肪的肝、肉或组织
a)2g匀浆的样品与10ml 3%的三氯乙酸(见配液1)在50ml聚苯乙烯离心管中混合,振