超高效液相色谱
目录
绪论
1
理论基础
2
仪器介绍
3
应用和展望
4
ACQUITY UPLCTM系统
超高效液相色谱的发展
站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。首先是改进生产力的需求,因为大量的样品需要在很短的时间内完成;其次是在生化样品及天然产物样品的分析中,样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求;第三是在与质谱等检测技术联用时,也提出了更高的要求。
由此,UPLC(超高效液相色谱)概念得以提出,将HPLC的极限作为自己的起点。
液相色谱40年的发展史是颗粒技术的发展史。颗粒度的改变直接影响到柱效,从而对分离结果产生直接影响。由下图可知:随着颗粒度的不断降低,色谱分离度不断提高。
μm小颗粒技术的UPLCTM,并非普通HPLC系统改进而成。它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料,而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障,以充分发挥小颗粒技术优势。这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。
在高效液相色谱速率理论中, Van Deemter方程式的简化表达式:
如果仅考虑固定相的粒度对的影响,其简化方程式可表达为:
超高分离度
1
随着dp的降低,N值会增加;而N值增加,则Rs值增加
ACQUITY UPLCTM系统: μm颗粒提供的柱效比5 μm颗粒提高了3倍。 μm颗粒的分离度比5 μm颗粒提高了70%。
UPLCTM与HPLC:分离度比较
μm颗粒提高了分离能力,可以分离出更多的色谱峰,从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。
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