如何测血糖-葡萄糖氧化酶法.doc

如何测血糖-葡萄糖氧化酶法
如何测血糖?测血糖的方法。葡萄糖氧化酶法,本文由广西吴唐糖尿病研究院提供。原理
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢:
在色原性氧受体(如联大茴香胺,4—氨基安替比林偶联酚)的存在下,过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色素原,生成有色化合物。
试剂
推荐应用有批准文号的优质市售试剂盒。以下试剂配制仅供参考。
():,用lmol/,然后用蒸馏水稀释至1L;
:取葡萄糖氧化酶1200U,过氧化物酶1200U,4-氨基安替比林l0mg,叠氟钠100mg,加上述磷酸盐缓冲液至80ml左右,,加磷酸盐缓冲液至100ml,置冰箱保存,至少可稳定3个月;
;重蒸馏酚100mg溶于l00ml蒸馏水中,贮存于棕色瓶中;
:酶试剂及酚溶液等量混合,在冰箱内可以存放1个月;
(100mmol/L):称取无水葡萄糖(预先置80'C烤箱内于燥恒重,移置于干燥器内保存),以12mmol儿苯甲酸溶液溶解并移入
100ml容量瓶内,再以12 mmol/L苯甲酸溶液稀释至l00ml刻度处,放置至少2h后方可应用;
(5mmol/L):吸取葡萄糖标准贮存液5ml,于l00ml容量瓶中,用l2 mmol儿苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
手工操作
取数支16mmXl00mm试管,按下表进行操作。
混匀,置37'C水浴中,保温15min,用分光光度计,波长505nm,,以空白管调零,分别读取标准管及测定管吸光度。
计算
参考值
-(70一110mg/dl)。
附注
-D葡萄糖高度特异,溶液中的葡萄糖约36%为α型,64%为β型。,可加速这一反应,但在终点法中,延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。
,一些还原性物质如尿酸、抗坏血酸、胆红质和谷胱甘肽等,可与色原性物质竞争过氧化氢,从而消耗反应过程中所产生的过氧化氢,产生竞争性抑制,使测定结果偏低。然而,在本法的测定条件下,溶血标本血红蛋白浓度达