实验四 布鲁氏菌病检疫.doc

实验四布鲁氏菌病检疫
(一)实验目的
初步掌握布鲁氏菌病试管凝集试验的免疫生物学检疫方法。(二)实验原理
应用血清学方法检出血清中有抗体存在,则说明被检动物为布氏杆菌病患畜。动物感染布氏杆菌以后首先出现的是凝集抗体,再过一段时间才出现补体结合抗体,最后产生变态反应性。补体结合反应是一种高度特异性的,其阳性反应与感染的符合率,比血清凝集试验与感染的符合率高。我国的家畜布氏杆菌病检疫应用的免疫生物学方法主要是凝集试验。试管凝集反应:本试验按《家畜布氏杆菌病试管凝集反应技术操作规程及判定标准》进行。(三)实验准备抗原:由兽医生物药品厂生产供应。%石炭酸生理盐水作1:20稀释,长霉或出现凝集块的抗原不能应用。
被检血清:必须新鲜,无明显蛋白凝固,无溶血现象和腐败气味。阳性血清和阴性血清:由兽医生物药品厂生产供应。
稀释液:%石炭酸生理盐水,用化学纯石炭酸与氯化钠配制,经高压灭菌后备用。
用具:1ml滴管、10ml滴管、试管架、洗耳球、10ml玻璃试管、移液器。(四)实验步骤
(一)布病试管凝集反应
1、牛血清稀释和加抗原的方法
试管号(牛编号) 血清最后稀释度
%石灰酸生理盐水(ml) 被检血清(ml) 诊断抗原1:20 判定 2、比浊管配制方法
试管号 1 2 3 4 5
抗原稀释(ml) 1:40
0
%石灰酸生理盐水(ml)
0
清亮度% 100 75 50 25 0
判断(标记)
++++ +++ ++ + -
1 1:25 0
2 1:50 0
3 1:100
4 1:200
5
1:400

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