常用缓冲液及培养基配方.doc

常用缓冲液及培养基配方
LB液体培养基:
Bacto-蛋白胨酵母抽提物
10g 5g
氯化钠 10g
加950ml蒸馏水溶解,,定容至1000ml,高压灭菌后保存。 LB固体培养基:
每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。 SOB液体培养基
Bacto-蛋白胨
20g
酵母抽提物 5g NaCl
加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N ,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。 SOC液体培养基
SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。麦康凯固体培养基
每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。 NA固体培养基
牛肉浸膏
酵母浸膏蛋白胨蔗糖琼脂粉
3g
1g 5g 10g 15g
加950ml蒸馏水溶解,,定容至1000ml,高压灭菌后保存。 TB培养基:
: Bacto-蛋白胨酵母抽提物
12g 24g
甘油 4ml
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ mol/L K2HPO4的溶液。。溶液Ⅰ
葡萄糖 g
1mol/L Tris·Cl() EDTA() 5ml
,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。溶液Ⅱ
10 mol/L NaOH 10% SDS 用水定容至100 ml,现配现用。溶液Ⅲ
5 mol/L 醋酸钾
50mmol/L 20mmol/L 10mmol/L
2ml 10ml
60ml
冰醋酸
水
高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液
10mmol/L , pH *
EDTA, pH *
1mol/L NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB抽提液
2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)
100mmol/L ,pH *
NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/ NaCl)
在80ml NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。如果需要,可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml.
CTAB沉淀液
1%(w/v) CTAB
50mmol/L , pH
10mmol/L EDTA,
PBS缓冲液:
十二水磷酸氢二钠
磷酸二氢钾
氯化钠
氯化钾
定容至5000ml, 。
ELISA包被液:
碳酸钠
碳酸氢钠
定容至1000ml,。
ELISA洗涤液( PBST):
5000ml