LCMS原理及图谱分析GCMS原理及图谱分析分析制备方法-米莉莉.ppt

色谱分析课程
Analysis Dept.
分析部提供色谱分析和分离纯化服务
◆色谱分析项目包括以下:
LC-MS
HPLC
GC-MS
Chiral HPLC
◆分离纯化项目包括以下:
PREP-HPLC
Chiral PREP-HPLC
LC-MS
◆
1. 均匀取样: 将样品混合好再取样。
2. 送样量: 固体约为1mg 、液体约为10ul。
3. 要求样品必须澄清透明,以免损坏色谱柱;
若样品混浊,请用滤头过滤后再测样.
4. 请使用甲醇、乙腈、水、THF、DMSO、
DMF等极性溶剂溶解样品,尽量避免使用正
己烷等非极性、弱极性溶剂溶样.
5. 设样时请自己记住样品报告的Datafile,以便快
速查找报告.
6 . 正在进样时不能往样品盘放样品.
◆
LC/MS (Agilent 1100 LC , VL MS; Shimadzu 2010 A )
ESLD (SEDEX 75; PL1000 )
→ESLD
HPLC → DAD→
→MSD
样品先经过色谱柱的分离后进行DAD测试,再分流两路进入ELSD和MS检测器测试。
◆. 检测器的说明
二极管阵列检测器(Diode-Array Detector,DAD)
分析整个波长范围(190nm- 800nm)有吸收的组分,提供三维信息(T--A) ,确定最大吸收波长. 其中在我们的报告提取波长为214nm的色谱图.
蒸发光散射检测器(Evaporation light-scatter
Detector ,ELSD)是一种质量型检测器,对所有固体物质均有几乎相等的响应,与待测物的光学性质或电化学性质无关,故对于没有光学吸收特征的物质可获得检测.
液质联用(liquid Chromatagraphy-Mass Spectrometry) 可提供色谱,光谱,质谱等多种信息,
其中在我们的报告中打印有
总离子色谱图(Total ion current chromatogram,TIC),
提取离子色谱图(extract ion chromatogram,EIC) ,
质谱棒状图(Mass spectrum)
 
总离子色谱图TIC ---分析时间内所有扫描获得的离子
流强度对时间作图所得的色谱图.
提取离子色谱图EIC—根据监测化合物分子量提取其产生的离子流强度对时间作图所得的色谱图.
质谱棒状图---不同质量的离子质荷比与其相对的离子强度所形成的谱图
三. 色谱条件:
◆酸性条件: %-% TFA in ACN and H2O; gradient 10% to 90%;

酸法                               
1-L-P            常规酸法正离子             
1-L-P-S         短柱酸法正离子                    
1-L-P- CN         CN基柱酸法正离子    
            
◆碱性条件: ACN/10mM NH4HCO3 in H2O; gradient 10% to 90%;
碱法                             
2-L-P           碱法正离子                           
2-L-N          碱法负子

分析报告的格式与解释
图1:ADC ELSD: 蒸发光散射检测器检测的色谱图。
图2:DAD 214nm 紫外波长为214nm的色谱图.
对于较纯的样品,色谱峰在1000mAu范围内表明样品浓度较适宜, 若色谱峰过高,表明样品浓度较高,所检测出的杂质百分含量校高。
图3:MSD TIC 总离子色谱图
图4:EIC提取离子色谱图;正离子模式(pos,positive +H,+Na ) 或负离子模式(neg ,negative -H)。
图5:质谱棒状图。
积分结果表:分别表示ELSD、DAD 214nm色谱峰的面积百分比, 其中MSBase项提供的数据因软件问题有所出入,该项数据不作参考。
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