CD59特异位点的短肽封条对HeLa细胞凋亡作用的研究.doc

CD59特异位点的短肽封条对HeLa细胞凋亡作用的研究.docCD59特异位点的短肽封条对HeLa细胞凋亡作用的研究
:李丽, 池沛冬, 孟锐, 杨滨燕, 吴长有
【关键词】 BrdU 增殖流式细胞仪细胞活化
[Abstract] AIM: To investigate the correlation of BrdU incorporation healthy persons ulated by PMA plus Ionomycin at different periods of time, BrdU eter. RESULTS: The peak of BrdU incorporation ulated for 48 hours in vitro, but no further increase of the peak of BrdU incorporation e. The parison made betulated for 8 hours ulated for 24 hours. Furthermore, no correlation betulated for 8 hours but no obvious increase e. C ulated ulated by PMA plus Ionomycin. Similarly, the percentage of BrdU+CD8+ T cells eter to evaluate the proliferation of T cells. Only a feulation and BrdU incorporation is dependent on stuimulants and time of stimulation. Therefore, BrdU incorporation is not correlated arkers and cytokine production.
[Keyeter; cell activation
通常, 人们都是通过3[H]脱氧胸腺嘧啶苷掺入法或MTT比色法来检测T细胞增殖, 这些方法测定步骤较多, 或敏感性相对较低, 且不能从单个细胞水平评价细胞增殖, 具有一定限制性。与这些方法不同, 脱氧胸腺嘧啶苷的类似物5′溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine, BrdU)可在细胞合成DNA时替代胸腺嘧啶, 通过固定和破膜, 加入荧光标记的抗BrdU抗体, 利用流式细胞术检测BrdU掺入率, 从而反映细胞增殖水平[1]。因此, BrdU掺入法在检测细胞增殖时, 同时还可以检测表面和胞内分子的表达, 从而实现了在单个细胞水平分析细胞增殖。本研究我们系统地比较了不同刺激条件下T细胞的增殖及其与细胞活化分子和细胞因子表达的关系, 为基础和临床研究提供科学依据。
1 材料和方法
材料 APC标记的抗CD4抗体(APCCD4)、 APCCD8、 PECD3、 APCIFNγ、 APCIL2以及相匹配的对照抗体, 鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)、鼠抗人CD3 mAb(antiCD3)均购自BD/Pharmingen公司(Becton Dickinson/PharMingen USA); PMA、 Ionomycin、 BrefeldinA(BFA)及PI均为Sigma公