开胸顺气丸微生物限度方法验证研究.doc

开胸顺气丸微生物限度方法验证研究
郑敏路京赵静卫延明吕倩
(渭南市食品药品检验所陕西渭南 714000)
【摘要】目的:建立开胸顺气丸的微生物限度检查方法。方法:采用常规法,培养基稀释法进行计数方法验证,采用直接接种法进行控制菌方法验证。结果:可采用培养基稀释法()进行细菌菌数检查,可采用常规法进行霉菌和酵母菌数检查;可采用直接接种法进行大肠埃希菌和大肠菌群的控制菌检查。
【关键词】开胸顺气丸;微生物限度检查;方法验证
【中图分类号】 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)21-0388-02

仪器
MJ-Ⅱ型霉菌培养箱(上海一恒科技有限公司);SPX-150型生化培养箱(上海金慧科电子有限公司);SPX-250B-Z型生化培养箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)
材料
,药品批准文号为国药准字Z61021232由陕西利君现代中药有限公司生产。
[(B)63501],金黄色葡萄球菌[(B)26003],大肠埃希菌[(B)44102],白色念珠菌[(F)98001],黑曲霉[(F)98003],均由陕西省食品药品检验所提供。
,玫瑰红钠琼脂培养基,胆盐乳糖培养基,MUG培养基,乳糖胆盐发酵培养基,改良马丁液体培养基,氯化钠蛋白胨缓冲液,以上培养基均由北京陆桥技术有限公司提供。
稀释液:(1)%无菌氯化钠溶液(用于菌液稀释);(2)-蛋白胨缓冲液(用于供试品制备)。

实验菌液制备
按照《中国药典2010年版一部》附录要求,采用10倍稀释法将5种阳性菌分别稀释至50~100cfu/ml的菌悬液,备用。
供试液的制备
取供试品10g,研细,加入到100ml -蛋白胨缓冲液中,振摇,使制备成1:10供试液,备用。
方法验证

常规法
本法进行3次独立的平行试验,并计算各试验菌每次试验的回收率。试验组:分别取供试液(1:10)1 ml,菌稀释液(-1~-1)1ml注入培养基培养,采用平皿计数法,同法测定所加的试验菌数作为菌液组,测定供试品的本底菌数作为供试品对照组。
结果见表1。
表1 细菌、霉菌和酵母菌回收率试验结果(cfu/皿)
*
试验结果表明,采用稀释法(),金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的回收率仍低于70%,而采用稀释法(),金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的回收率均高于70%,故采用培养基稀释法()可消除供试品对这两种菌的抑制作用。



参照《中国药典2010年版一部》附录控制菌检查大肠埃希菌项下进行试验;结果见表
3。
表3 大肠埃希菌检查方法验证结果
*
注:(+)表示呈阳性反应即产酸产气(-)表示呈阴性反应即不产酸产气
表3、表4试验结果可以看出,试验组和阳