血清总胆固醇（TC）的测定.doc

血清总胆固醇(TC)的测定
陈福刚(黑龙江省克山县第一人民医院黑龙江克山 161600)
【中图分类号】 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)10-0036-01
【关键词】血清胆固醇测定
胆固醇(cholesterol)是体内主要脂类之一。人体内胆固醇来源除由食物摄取外,也可体内合成。人体除脑组织外,几乎所有组织都合成胆固醇,其中肝脏是合成胆固醇的主要场所。肝脏不仅是合成胆固醇的主要场所,也是调节血浆胆固醇水平和胆固醇脂与游离胆固醇比例的场所。
血中胆固醇有两种形式,一种是和脂肪酸结合的,称为胆固醇酯,另一种是未和脂肪酸结合的,称为游离胆固醇。血浆脂蛋白分子中的游离胆固醇,可以通过卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)催化作用而接受卵磷脂β-碳位上脂酰基而生成胆固醇酯。LCAT是在肝脏中合成,因此,肝细胞损伤时,血浆胆固醇酯化作用减弱,血浆中的胆固醇酯浓度下降。
正常人血浆中胆固醇约1/3以a-脂蛋白的形式转运,2/3以β-脂蛋白形式转运,TC=HDL-C+LDL-C+VLDL-C。
胆固醇是体内某些激素、维生素和胆汁酸等合成的原料。肝脏中的胆固醇,约80%直接转化为胆酸,胆酸又与甘氨酸或牛磺酸生成胆汁酸,随胆汁进入肠内,对肠内脂类的消化吸收起重要作用。肾上腺皮质内的胆固醇,经酶催化可转变成肾上腺皮质激素和性激素。此外,胆固醇在人体皮肤内可以氧化脱氢生成7-脱氢胆固醇,再经紫外线照射生成维生素D3,它能促进钙、磷的吸收,有利于骨骼的生成。
血清中胆固醇的浓度可作为脂类代谢的指标,但脂类代谢又常与糖类和激素的代谢密切相关,故在其他物质代谢异常时也可影响血清胆固醇的浓度。
【原理】(CHOD-PAP法,又称氧化酶法)
酯化的胆固醇经酶水解后,经胆固醇氧化酶氧化,所产生的H2O2与4-氨基安替比林和ESBmT反应生成紫红色色素,颜色深浅与胆固醇含量成正比。
【试剂组成】(液体双试剂)
-氨基安替比林;胆固醇酯酶;过氧化物酶;缓冲液。
;ESBmT;缓冲液。
【操作方法】
:S:R1:R2=3:260:130。
:终点法、反应方向向上。
=600/700nm。
以OLYMPUS AU600型自动分析仪的操作方法为例:
标本+试剂①37℃测试吸光度Ⅰ+试剂②37℃测试吸光度Ⅱ,计算浓度。
3μl 260μl 130μl 5min
吸光度Ⅰ,Ⅱ:600nm与700nm吸光度的差。
不同厂家生产试剂,试剂组成、分析参数略有不同。
【结果计算】
C——测定TC,mmol/L;
△A测定——标本管吸光度;
△A标准——标准管吸光度;
C0——校准血清TC浓度,mmol/L;
△A=A2-A1。
【参考范围】
血清TC水平受年龄、家族、性别、遗传、饮食、精神等多种因素影响,因此很难制定统一的参考值。一般认为<,边缘水平:~;危险水平&ge;。儿童<。
【注意事项】