实验六-IMViC实验幻灯片.ppt

实验六IMViC与硫化氢试验
实验目的:
学习掌握IMViC与硫化氢试验原理
了解IMViC与硫化氢试验反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义与方法
IMViC是吲哚(indol)、甲基红(methyl red test)、伏-普(Voges-Prokauer test)和柠檬酸盐(citrate test)四个实验的缩写,主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌,多用于水细菌学检查。硫化氢试验也是检查肠道杆菌的生化试验。大肠杆菌虽非致病菌,但在饮用水中超过一定数量,则表示受粪便污染,产气肠杆菌也广泛存在于自然界中,因此检查水时要将两者分开。
实验原理:
a. Indole Test 吲哚试验
吲哚试验是用于检测吲哚的产生,某些细菌可产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。对二甲基氨基苯甲醛遇吲哚形成玫瑰吲哚(红色)
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚

吲哚试剂
大肠杆菌+
产气杆菌-
c. Voges-Proskauer (V-P) Test
伏-普试验是用以检测某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力,例如丙酮酸,丙酮酸缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性条件下能被空气中的氧气氧化生成二乙酰,后者与蛋白胨中的胍基作用生成红色化合物。
葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙酰→红色化合物+
胍基化合物
葡萄糖→丙酮酸
大肠杆菌-
产气杆菌+
硫化氢试验检测硫化氢的产生,细菌分解含硫有机化合物如半胱氨酸等产生硫化氢,硫化氢遇培养基中的铅盐或铁盐等形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀。
d. Hydrogen Sulfide (H2S ) Production硫化氢试验
I M Vi C试验
VP test
Citrate utilization test
Indol test
Methyl test
I
M
Vi
C
大肠杆菌
+
+
—
—
产气肠杆菌
—
—
+
+
常用于肠道杆菌的鉴定