MSCs调控脓毒症小鼠NK细胞的体内实验研究.docx

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引言：
脓毒症，是严重感染引起的一种临床综合症，以感染进展迅速，病情严重，畏寒、发热、体重下降、血压下降、脱水、呼吸困难、心血管系统衰竭等表现为主要临床特点。脓毒症病死率较高，如不能及时治疗，常导致多器官功能衰竭，从而危及患者生命。
许多研究表明，MSCs具有免疫调节作用和组织修复能力，可作为一种治疗脓毒症的有效手段。然而，MSCs调控脓毒症的分子机制并不清楚，在体内的作用也有待研究。
本次研究的目的在于探讨MSCs对脓毒症小鼠NK细胞的调控机制，以期为脓毒症临床治疗提供新的思路和方法。
材料与方法：
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雄性C57BL/6小鼠，体重20 g，均分为对照组、模型组、MSCs组，每组10只。模型组和MSCs组小鼠均采用腹腔注射丙酮菌素（AKP，30 mg/kg）和利奈唑肟（LPS，10 mg/kg）建立脓毒症模型，对照组不注射药物。 mL/kg体重的MSCs（1×10^6 cells/mL）。
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成年小鼠骨髓采集后，将骨髓细胞在培养基中培养，并取出半悬浮的细胞，继续培养并更换培养基，最后取出MSCs。
（FACS）分析：
收集小鼠外周血样本，离心去除细胞上清液，用PBS洗涤沉淀，加入非特异性抗体，孵育、洗涤后送入FACS仪中分析。
（qPCR）：
采用qPCR测定细胞RNAs的相对表达量。
结果及分析：
1. MSCs治疗能够提高脓毒症小鼠的生存率，显著降低模型组小鼠的死亡率（P<）。
2. 流式细胞术（FACS）结果显示，MSCs组小鼠血中的NK细胞占比比模型组显著升高（P<）。
3. qPCR结果显示，在MSCs组中，人MIP3α mRNA相对表达量显著高于模型组（P<）。
4. 在Treg细胞培养液中，加入MSCs处理细胞与未处理细胞对比，发现加入后Treg细胞的活化程度明显提高。
结论：
MSCs治疗能够提高脓毒症小鼠的生存率，显著升高NK细胞数量，同时在Treg细胞培养液中加入MSCs后，Treg细胞的活化程度也明显提高。这些结果表明，MSCs具有调节免疫系统、促进炎症清除的能力，有望成为一种治疗脓毒症的新方法。MIP3α可能是MSCs调控NK细胞的一种分子机制，有待进一步研究。