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地中海贫血的诊治进展
概述
地中海贫血简称“地贫”,又称“海洋性贫血”, 珠蛋白生成障碍性贫血等。
基因定位
发病机制
“经典”治疗
造血干细胞移植的“根治”疗法
基因疗法
一、地贫的诊断进展
地贫的诊断进展
地贫的临床诊断技术主要向两个方向发展:
①临床诊断的普及和简化技术的探讨,以便筛查工作规范,简便。
②分子诊断技术的不断改进以提高“现症者”的诊断准确率和满足临床上“高危胎儿”的出生前诊断。
㈠地贫普查
红外线光谱学(infrared spectroscopy, IRS)
运用光谱红外波段的光波照射待检样品,通过细致地分析获取的红外吸收和/或反射光谱,揭示待测样品构成分子的分子振动特性。简言之,红外光谱实际上是对待检测样品进行的分子“指纹”鉴定。
红外线光谱学
Liu KZ等的研究表明:重型β0型地中海贫血患者的血红蛋白光谱变化包括:α-螺旋结构含量的减少,平行和反平行β-折叠结构含量的增加,以及半胱氨酸红外线吸光度的减低(见图)。
IR spectra of Hb from controls and β-thalassemia patients
㈡分子诊断技术
目前广泛沿用的分子诊断技术:
⑴α地贫
Southern印迹杂交:应用α珠蛋白基因探针可把缺失型血红蛋白H病、Bart’s水肿胎儿等准确地检测出来。
PCR方法:此方法可用于Bart’s水肿胎儿及α地贫杂合子的诊断。
多重PCR:设计多对引物检测该基因的不同外显子区域,即用同一PCR体系扩增多个外显子,然后用电泳检测有无缺失的片段。
分子诊断技术
跨越断裂点的PCR扩增法(gap-PCR) :其原理是将引物分别设计在基因断裂点附近的上游和下游,通过PCR产物直接确定检测DNA基因型。当缺失存在时,PCR扩增出相应的阳性片段。
分子诊断技术
⑵β地贫
反向点杂交(RDB) :将膜上固定探针取代固定靶DNA的方式,从而改变了传统杂交法一次只能检测一种突变的方式。用固化了多种特异性ASO探针的膜条与扩增靶序列杂交,使一次杂交即可同时筛查出被检DNA中多种突变。