生物化学与分子生物学-硕士论文.doc

分类号密级
UDC 编号
大连大学
硕士学位论文

论文题目低温淀粉酶产生菌生物学特性的研究
姓名王鑫
学科、专业生物化学与分子生物学
指导教师迟乃玉
年级 2008级
论文答辩日期
Master's Degree Dissertation
Title:
Study on the biological characteristics of a novel cold-active amylase-producing strain

. candidate: Xin Wang
Advisor: Naiyu Chi
Field of research: Biochemistry and molecular biology
Date of defence:
Chairman of mittee:
Degree awarded by: Dalian University
独创性说明
作者郑重声明:本硕士学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。
作者签名: 日期:
摘要
本论文样品采集于长兴岛海水和海泥,以可溶性淀粉作为唯一碳源初筛得到8株产低温淀粉酶菌株,复筛编号为SX001菌株产酶活最高,。以菌株SX001为出发菌株进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定,鉴定该菌为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens), GenBank ID:HM631729。
该菌产生的低温淀粉酶酶学性质初步研究,确定最适作用温度为30℃,酶的热稳定性比较差,,并且具有一定的耐碱性,金属离子和表面活性剂对酶活的影响都不是很明显;薄层层析鉴定酶解产物基本为葡萄糖,表明该菌株所产低温淀粉酶为糖化酶。
单因素实验及正交实验优化产低温淀粉酶菌株SX001发酵培养基,优化培养基组分为:%,%,NaCl %,%,。正交方差分析4种因素均不显著,说明菌株SX001对培养基成分没有特殊要求,可作为大规模工业生产研究的优良出发菌株。
单因素实验及正交实验优化产低温淀粉酶菌株SX001发酵条件,较优培养条件为:培养时间60 h,温度为18℃,,接种量3%,装液量30%,。正交方差分析温度具有显著性,说明菌株SX001产低温淀粉酶对温度要求比较严格。
通过实验确定三种显著因素为可溶性淀粉、温度、牛肉膏,对整体发酵工艺进行响应面优化,建立的响应面模型非常显著,失拟项不显著。通过等高线图分析,三种显著因素的两两交互作用均比较显著。经过Minitab , g/L, g/L,℃,,,基本一致。
关键词:低温微生物;低温淀粉酶;发酵工艺
Study on the biological characteristics of a novel cold-active amylase-producing strain
Abstract
Using starch as the sole carbon source,we isolated 8 strains producing cold-active amylase from the water and mud samples collected in Changxing Island. After rescreening, in which the highest activity of the amylase in the strains numbered SX001, which the activity of the amylase was , was used as the experimental strain. Through morphological, physiological, biochemical and molecular biological identification, SX001 was indentified as a strain of Pseudomonas fluorescens, and its GenBank ID is HM631729.
On the preliminary study on t