实验室常用缓冲液、试剂的配制方法
#1MTris-HCl(,,)#
组份浓度:1MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
。
,充分搅拌溶解。
。
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,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位。
#10&timeTEBuffer(,,)#
组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA
配制量:1L
配制方法:
,置于1L烧杯中。
,均匀混合。
,高温高压灭菌。
。
#MTris-HCl()#
组份浓度:MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
。
,充分搅拌溶解。
。
。
,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位。
#3M醋酸钠()#
组份浓度:3M醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解
4高温高压灭菌后,室温保存。
#Buffer#
组份浓度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4
配制量:1L
配制方法:
,置于1L烧杯中。
,充分搅拌溶解。
,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
,室温保存。
注意:上述Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。
#10M醋酸铵#
组份浓度:10M醋酸铵
配制量:100ml
配制方法:
~200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解。
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注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
#Tris-HCl平衡苯酚#
配制方法:
:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160
℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作
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