酸性磷酸酶Km及Vmax值测定 清洗试管24支
酸性磷酸酶:
催化磷酸单酯的水解反应
存在于人的肝脏,前列腺等处
植物中以发芽的种子中含量最为丰富。
是生物体中重要的一种酶类,为某些疾病的检测指标。
一、概述
酶液
磷酸苯二钠苯酚+ 磷酸氢二钠
folin-酚测定酚的浓度
计算出反应速度(用产物生成量/min来表示)
根据双倒数法计算出Km及Vmax
二、实验原理
V=
Vmax
[S]
[S]
Km
+
三、实验步骤:
1、豆芽中的酸性磷酸酶的粗提取
2、制作酶反应时间与产物生成量的关系曲线
3、制作酚标准曲线
4、[S]与V0关系实验
5、双倒数作图法计算Vmax和Km
buffer
substrate
enzyme
Certain Time
blank
Stop the reaction
Color developed
生化实验课老师:于晓虹
实验报告请交到讲台上来
酶液稀释取上清液300微升,稀释30倍,用大试管装
科代表李博恒
1、磷酸酶原液的制备:
称取5g绿豆芽茎(去头去根),。纱布过滤,,以6000rpm,离心20min,取上清。
上清液用pH ,用于实验。
2、制作酶反应时间与产物生成量的关系曲线
(目的:选取合适的反应时间)
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