8 环境样品的采集和处理.ppt

第八章环境样品采集和处理
主要内容
土壤和沉积物
表层土壤采样技巧和方法
地下采样技巧和方法
样品的处理和保存
水
采集水样的技巧和方法
病毒分析的水样处理
检测细菌的水样处理
寄生原生动物检测的水样处理
黏染物中微生物的检测
土壤和沉积物
土壤中微生物群落间存在巨大差异
深度
土壤类型
地点
时间
总体采样:取决于分析目的、可用资源以及采样地点状况。
复合样品
一段时间同一地点同一位置连续采样
质量保证工程方案QAPP
QAPP中采集与保藏的规则
采样策略:样品的数量和类型、位置、深度、时间、间隔
采样方法:采用专一的技术和设备
样品保藏:容器的类型、保存方法、最长保存时间
表层土壤采样技巧和方法
工具:土样掘凿钻
确保采样深度
手动掘凿钻(如下图) m深的样品
注意:降低污染
使用无菌抹刀将土样芯的外层刮掉,只用内芯进行分析
每次采样后清洗掘凿钻——水洗,75%的酒精或10%的漂白剂溶液冲洗,无菌水冲洗
采样:复合样品
先大面积采样,再从每个样品中称取等量土样与桶或塑料袋中混合
表层土壤采样技巧和方法
有些时候,需要采样一系列实验样方,以便测试土壤改良(如肥料、杀虫剂或污泥)对微生物群体的影响——二维采样法
下图给出了几种典型的二维采样模型,包括随机、横切、两级和方格采样。
表层土壤采样技巧和方法
三维采样:得到有关深度的信息
5~10 cm深度的样品,也能钻入几百米乃至地下渗流带
需要特殊设备
根际区:从根表(跟面)到根系对微生物特性不产生影响的土层,一般2~10 mm
微生物活性很强
特异性植物-微生物之间的相互作用
采集:小心挖掘,轻轻摇动除掉土块或非根际区土壤,黏附在根系上的即为根际土壤
地下采样技巧和方法
用于深或浅地下环境采样的方法取决于地下土壤的饱和与否
⑴未饱和系统:空气旋转钻
维持无菌环境和防止污染:
μm高效微粒空气(HEPA)过滤器进行预过滤。
在土芯样采到后,其表层的土应立即用无菌铲刮掉, 亚土芯样用一个60 ml的无菌开口塑料注射器盛装
最后立即冷冻并送往实验室,微生物分析在采样后18 h内进行。
地下采样技巧和方法
(2)饱和系统:黏着性小
中空采掘钻: m
地下采样技巧和方法
泥浆旋转钻: m
例如,南卡罗来纳州东南海岸平原的取样, ~ m深度范围的样品
钻孔液中加了示踪剂(溴化钾和若丹明染料)
采集芯样是一个困难的过程
⑴时间与资金的筹备,采掘与取出,芯样的代表性;
⑵地下物的水平异质性;
⑶避免样品污染,保存与分析。
样品的处理和保存
时间与保存十分重要
潮湿环境下,样品于4℃下保存3个月,微生物数量和活性照样减小
表层土壤分析
⑴风干,用2 mm的筛子除去石子和碎片(避免水分过低) ;
⑵ 4℃下短期保存(避免干透)
注意:不需无菌处理
地下样品处理需十分小心
⑴数量少;
⑵地下沉积物不与大气接触;
⑶费用高