尿液结核分枝杆菌检测对肾结核的诊断价值.doc

尿液结核分枝杆菌检测对肾结核的诊断价值
【摘要】目的探讨尿液结核分枝杆菌检测在肾结核诊断中的应用价值。方法对108例已确诊为肾结核的患者尿液标本分别采取抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量PCR三种方法进行检测, 其结果进行分析。结果抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、%、%、%。结论尿液结核分枝杆菌检测属病原学检测, 特异性好、操作简便, 对肾结核的诊断有着重要的应用价值。
【关键词】尿液;结核分枝杆菌;肾结核;诊断
结核病是全球严重的公共卫生问题之一, 据WHO估计, 全球有约20亿人感人结核分枝杆菌, 每年有约200万人死于结核病[1]。近年来, 随着结核病发病率在全球范围内的回升, 肾结核的发病率也明显增加。据统计, 全球每年有近千万人感染结核病, 而肾结核约占其中的8%~20%。该病进展隐蔽, 发现时, 肾功能已部分或完全丧失, 患者早期诊断困难, 以致延误治疗, 对人们的身体健康危害极大。因此早诊断对治疗尤为重要。在众多辅助检查中, 除病理诊断外, 实验室病原学检查具有较高的特异性, 且操作简便, 患者无痛苦。现就最常用的抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量PCR三种检测方法进行分析, 评价其在尿液结核分枝杆菌检测对肾结核诊断的应用价值。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 2010年11月~2013年10月本院住院的肾结核患者, 共计108例。男性58例, 女性50例。其中小于20岁者7例, 大于40岁者27例, 20~40岁者74例, %;单侧肾结核87例, 双侧肾结核21例;合并其他脏器结核病(如肺结核、脊柱结核、肠结核、附睾结核等)65例, %。
1. 2 标本收集
1. 2. 1 抗酸菌涂片染色检测留取12 h尿液, 静置, 倾去上清液, 留取沉淀部分30 ml, 以3000 rpm离心30 min, 弃上清, 取沉淀物涂片。
1. 2. 2 改良罗氏培养和荧光定量PCR检测嘱患者留取晨尿, 因晨尿浓缩, 适用于做病原学检查。在留取尿液之前先用消毒液清洗外阴, 以去除污染菌。分别留取中段尿约20~30 ml于一次性无菌塑料标本杯中各一杯。为提高检出率, 所有患者均连续留取3 d标本, 置于2~8℃冰箱中贮存, 于3 d后将尿液混合进行改良罗氏培养和荧光定量PCR检测。如患者正在进行抗结核药物治疗时, 应停用所有抗结核药一周, 以提高结核杆菌的检出率。
1. 3 试剂与仪器
1. 3. 1 抗酸菌涂片染色试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。无需特殊仪器。
1. 3. 2 罗氏培养改良酸性罗氏培养基由珠海贝索生物技术有限公司提供。隔水式培养箱由天津市泰斯特仪器有限公司提供。
1. 3. 3 荧光定量PCR 由中山大学达安基因股份有限公司提供试剂。仪器LightCycler 。
1. 4 方法
1. 4. 1 ~ ml均匀涂于玻片上, 直径约2~3 cm, 火焰固定。滴加石碳酸复红染液布满标本, 保持3~5 min。流水自玻片一端冲洗洗去染液, 沥干剩余水分。滴加3%的盐酸酒精, 1~3 min后