大学生创新创业训练计划项目结题报告书(模板).doc

附表四:
大学生创新创业训练计划项目
结题报告书
 
 
 
项目名称: 黔北麻羊GHSR基因外显子2多态性及其与体重体尺的关联
项目负责人: 李达
项目主持单位: 贵州大学动物科学学院
指导教师: 罗卫星
签订时间: 2012年9月6日
贵州大学教务处制
项目名称
黔北麻羊GHSR基因外显子2多态性及其与体重体尺的关联分析
项目等级
国家级□省级级□校级□√
项目编号
项目类别
创新训练项目□√创业训练项目□创业实践项目□
负责人姓名
李达
班级
09动科a班
联系方式
**********
项目组
其他成员
序号
姓名
班级
项目分工
2
韦国渠
09动科a班
资料收集
3
赵英
09动科a班
样品采集整理
4
宋桃伟
研二
指导实验
校内导师
罗卫星
职称(职务)
教师
研究方向
遗传育种
企业导师
职称(职务)
所属单位
资助经费
1500元
支出经费
3000元
立项时间
2012年9月6日
完成时间
2013年4月28日
项目实施情况(1500字以内):
概要:本研究以黔北麻羊为试验对象,采用DNA池结合PCR产物直接测序及PCR-SSCP技术对GHSR基因进行单核苷酸多态性检测。结果发现,在黔北麻羊GHSR基因外显子2处检测到1个错义突变位点G200A,氨基酸由甘氨酸变为丝基酸,表现为3种基因型,分别命名为GG、GA和AA,其频率分别为:、,等位基因G、。χ2检验表明,黔北麻羊GHSR基因G200A位点分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>)。基因型与体重体尺的关联分析显示,GG和GA基因型个体的体重极显著高于AA基因型个体(P<),而其余6个指标差异不显著(P>)。
用Premier ,扩增山羊GHSR基因目的序列,引物送上海生工生物工程有限公司合成。
PCR反应体系及条件
DNA池PCR
PCR反应体系为DNA模板4 mL,上下游引物(10 pmol/mL)各3 mL,2×Taq PCR MasterMix 25 mL,加双蒸水至50 mL。PCR反应条件:94 ℃预变性4 min,94 ℃变性40 s, ℃退火45 s,72 ℃延伸45 s,35个循环,72 ℃再延伸10 min,最后4 ℃保存。
PCR-SSCP
PCR反应体系为15 mL,包括DNA模板2 mL,上下游引物(10 pmol/mL)各1 mL,2×Taq PCR MasterMix mL, mL。PCR反应条件:94 ℃预变性4 min,94 ℃变性30 s, ℃退火35 s,72 ℃延伸35 s,30个循环,72 ℃再延伸10 min,最后4 ℃保存。
单链构象多态性PCR产物用10%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶)电泳检测。5 mL PCR产物中加入8 mL变性剂(95%去离子甲酰胺,25 mmol/L EDTA,%二甲苯青,%溴酚蓝),于100 ℃沸水浴中变性15 min,置于-20 ℃冰箱中保存