槐米中芦丁的提取和精制(2010)实验报告.doc

实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定(一)实验目的要求制备芦丁,供药用。通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。熟悉重结晶技巧。了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。(二)实验的基本原理芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性质分离。芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分离的目的(如不纯可再重复操作进行分离)。也可采用醇溶水沉法进行精制。3. 芦丁的鉴定原理(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。(2)通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应),确定芦丁的成分类型(黄酮类)。(三) 实验内容1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。3. 溶剂重结晶精制芦丁。4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四)。:磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯,1000ml烧杯,50ml烧杯,250ml园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置,布氏漏斗,抽滤瓶、层析缸等。:硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。(五)(水提取法)称取槐米粗粉20g,在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中,加水200ml,用磁力加热搅拌器加热煮沸30min,趁热过滤。残渣同法操作一次,合并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全部析出后,减压抽滤,用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,干燥,称重,计算得率。(醇-水重结晶法)取粗制芦丁1g,置于250ml园底烧瓶中,加80%乙醇30ml加热回流15分钟,趁热抽滤。滤液置250ml烧杯中,向滤液中加蒸馏水(约3~4倍量)至溶液呈明显混浊,室温放置,抽滤得精致芦丁。用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,晾干,称重。(六)过程与现象记录Day1(2011-05-07)①,组装仪器。②原料放入500mL烧瓶中加水200mL(1-2),磁力搅拌加热。烧瓶中为咖啡色悬浮液,有甘苦气味,沸腾前不断产生小气泡上,液体中有明显漩涡(1-3)。102℃沸腾,产生大量气泡,药渣翻滚,漩涡被气泡遮盖(1-4)。加热过程中时常停止沸腾,续略升温2~3℃。随着时间的延长,液体颜色加深。煮沸规程中应控制液量,过少难以提出药品,过多容易喷出瓶口。③最初用抽滤法分离残渣(1-5),但是溶液很稠且含糖分较多,难以流下(1-6),并且易阻塞和冲破滤纸,还渐渐冷却。后改用离心法,5000r,15min(1-7),效果略好,但是溶液还是冷却,溶解的提取物较少。滤液为深黄色色,粘稠,气味浓厚甘甜。④再次将滤渣至于放入500mL烧瓶中加水200mL磁力搅拌加热30min,液体颜色略比第一次深。⑤将两次得到的浸液(约300mL)收集放入冰箱备用。Day2