槐米中芦丁的提取和精制(2010)实验报告.doc

薀莆芃实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定袆莃薀(一)实验目的要求艿蒆膅制备芦丁,供药用。芇肅螅通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。莂蒆蚃熟悉重结晶技巧。蒄薂莁了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。膁薆膇(二)实验的基本原理袄芄袃芦丁的提取原理衿羀肂利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性质分离。芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分离的目的(如不纯可再重复操作进行分离)。也可采用醇溶水沉法进行精制。蚆莄芆3. 芦丁的鉴定原理蚁聿蒁(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。肇袂薇(2)通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应),确定芦丁的成分类型(黄酮类)。蒀腿肆(三) 实验内容膄薄莄1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。艿艿羁2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。薅肂芈3. 溶剂重结晶精制芦丁。节荿肇4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁羆螄蒂(四)。:磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯,1000ml烧杯,50ml烧杯,250ml园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置,布氏漏斗,抽滤瓶、层析缸等。:硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。薃羃袅(五)(水提取法)羄莁螈称取槐米粗粉20g,在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中,加水200ml,用磁力加热搅拌器加热煮沸30min,趁热过滤。残渣同法操作一次,合并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全部析出后,减压抽滤,用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,干燥,称重,计算得率。(醇-水重结晶法)莅肃羃莀螈蒃取粗制芦丁1g,置于250ml园底烧瓶中,加80%乙醇30ml加热回流15分钟,趁热抽滤。滤液置250ml烧杯中,向滤液中加蒸馏水(约3~4倍量)至溶液呈明显混浊,室温放置,抽滤得精致芦丁。用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,晾干,称重。螆薁蕿腿袈肇(六)过程与现象记录膇芃莆Day1(2011-05-07)①,组装仪器。羁肈袄②原料放入500mL烧瓶中加水200mL(1-2),磁力搅拌加热。烧瓶中为咖啡色悬浮液,有甘苦气味,沸腾前不断产生小气泡上,液体中有明显漩涡(1-3)。102℃沸腾,产生大量气泡,药渣翻滚,漩涡被气泡遮盖(1-4)。加热过程中时常停止沸腾,续略升温2~3℃。随着时间的延长,液体颜色加深。煮沸规程中应控制液量,过少难以提出药品,过多容易喷出瓶口。蚅蒃蒄③最初用抽滤法分离残渣(1-5),但是溶液很稠且含糖分较多,难以流下(1-6),并且易阻塞和冲破滤纸,还渐渐冷却。后改用离心法,5000r,15min(1-7),效果略好,但是溶液还是冷却,溶解的提取物较少。滤液为深黄色色,粘稠,气味浓厚甘甜。螀膈莂④再次将滤渣至于放入500mL烧瓶中加水200mL磁力搅拌加热30min,液体颜色略比第一次深。肆膄羀⑤将两次得到的浸液(约300mL)收集放入冰箱备用。蒈芈袆Day2(2011-05-08)(1-7)(1-8)(1-9),干燥得粗制芦丁(1-10)。,置于250ml园底烧瓶中,加80%乙醇30ml,加热回流15分钟(1-11),加热前没有充分分散固体粗提物,趁热抽滤(1-12),得到黄色油状液体(1-13)。(1-14),没有产物。羄螂羅Day3(2011-05-14)(1)点滴显色反应从放置一周的粗提物中取芦丁的甲醇溶液(供试液)分别点在滤纸上,挥去溶剂,紫外照射,光吸收明显(1-15),然后分别添加供试液芦丁的甲醇溶液和显色剂2%三氯化铝乙醇溶液,显黄色(1-16),在紫外灯下λ365nm观察有明显亮斑(1-17)。肂薇螄(2) 薄层色谱鉴定袆羂肃吸附剂: 硅胶GF254薄层板()。袁蚇薀样品: 自制芦丁(用甲醇溶解,浓度约1mg/ml)芇蚄芁对照品: 芦丁对照品的甲醇溶液。蚀螇螆展开剂: 三氯甲烷-甲醇-甲酸(7∶3∶)莄膂蒅显色: ,然后在