槐米中芦丁的提取和精制(2010)实验报告.doc

1 实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定(一)实验目的要求 1. 制备芦丁,供药用。 2. 通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。 3. 熟悉重结晶技巧。 4. 了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。(二)实验的基本原理 1. 芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法) 。也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。 2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小, 在热乙醇中溶解度大, 以及在热水中溶解度大, 在冷水中溶解度小的性质分离。芦丁用溶剂加热溶解后, 趁热抽滤, 滤液放冷后能析出而达到分离的目的( 如不纯可再重复操作进行分离) 。也可采用醇溶水沉法进行精制。 3. 芦丁的鉴定原理(1) 利用吸附薄层色谱的分离原理, 芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开, 显色, 以达到鉴定芦丁的目的。(2 )通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应) ,确定芦丁的成分类型(黄酮类)。(三) 实验内容 、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。 。 3. 溶剂重结晶精制芦丁。 4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四) 实验药材仪器与试剂 1. 实验药材槐米 20g 。 2. 仪器:磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、 500ml 烧杯, 1000ml 烧杯, 50ml 烧杯, 250m l 园底烧瓶、 500ml 园底烧瓶、 100ml 量筒、 50ml 量筒、 100ml 锥形瓶、 50ml 锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置,布氏漏斗,抽滤瓶、层析缸等。 3. 试剂:硼砂、氧化钙、 HCI 、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、 PH 试纸等。(五)实验步骤 1. 提取(水提取法) 称取槐米粗粉 20g ,在研钵中研碎后放入 500ml 烧瓶中,加水 200ml ,用磁力加热搅拌器加热煮沸 30min ,趁热过滤。残渣同法操作一次,合并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全部析出后,减压抽滤, 用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,干燥,称重,计算得率。 2. 精制(醇- 水重结晶法) 取粗制芦丁 1g ,置于 250ml 园底烧瓶中,加 80% 乙醇 30ml 加热回流 15 分钟,趁热抽滤。滤液置 250ml 烧杯中,向滤液中加蒸馏水(约 3~4 倍量)至溶液呈明显混浊,室温放置,抽滤得精致芦丁。用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,晾干,称重。 2 (六) 过程与现象记录 Day 1 ( 2011-0 5-07 ) 1. 提取①称取研碎的粗槐米 ,组装仪器。②原料放入 500mL 烧瓶中加水 200mL ( 1-2 ) ,磁力搅拌加热。烧瓶中为咖啡色悬浮液,有甘苦气味,沸腾前不断产生小气泡上,液体中有明显漩涡( 1-3 )。 102 ℃沸腾,产生大量气泡,药渣翻滚,漩涡被气泡遮盖( 1-4 ) 。加热过程中时常停止沸腾,续略升温 2~3 ℃。随着时间的延长,液体颜色加深。煮沸规程中应控制液量,过少难以提出药品,过多容易喷出瓶口。③最初用抽滤法分离残渣( 1-5 ) ,但是溶液很稠且含糖分较多,难以流下( 1-6 ) ,并且易阻塞和冲破滤纸, 还渐渐冷却。后改用