抗凝血酶III(AT III)活性测定.doc

:抗凝血酶III能和凝血酶形成复合物,使之丧失转化纤维蛋白原为纤维蛋白的酶活性。在血浆中加入过量的凝血酶后,凝血酶与血浆中的ATIII形成1︰1复合物,剩余的凝血酶作用于显色剂,裂解出显色基团,其显色程度与血浆中的ATIII活性呈负相关。:患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成,~,储存于-20℃冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。:试剂购于天津威士达公司ATIII试剂盒:试剂盒代号OWWR15。试剂包括6×15ml凝血酶试剂;6×3ml底物试剂;1×100ml缓冲液。凝血酶试剂每瓶用15ml缓冲液复溶,室温平衡30分钟。底物试剂每瓶用3ml蒸馏水复溶,室温平衡30分钟。:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。:按仪器操作步骤执行标准操作。:按下机器侧面的POWER按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。:1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000个杯子)2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选ReagentSetting,按屏幕显示放置试剂。3、:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。:主菜单上按下WorkList键,进入工作菜单,输入AT-III项目。:,按顺序输入样本的序号。:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START键,开始检测。:使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。每批质控品的值不超过2SD。(详见出凝血1质量控制):仪器自动计算出结果。:75~125%,由DADEBEHRING公司推荐。:遗传性AT-III缺乏可分为两型:CRM-型,即抗原与活性均下降。CRM+型,抗原正常,活性下降。遗传性AT-III缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病,本病患病率约1/5000,发病多在10-25岁,患者常在手术后、创伤后、感染后、妊娠或产后发生静脉血栓,并可反复发生血栓。CRM-患者血浆中AT-III生物活性与抗原性约为正常人的50%左右;CRM+其