白藜芦醇心肌缺血再灌注损伤炎症小体论文.doc

【提示】本文仅提供摘要、关键词、篇名、目录等题录内容。为中国学术资源库知识代理,不涉版权。作者如有疑义,请联系版权单位或学校。【摘要】目的:本研究通过建立大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的模型,并给予不同浓度白藜芦醇干预,探讨白藜芦醇是否可以发挥保护心肌缺血再灌注损伤的作用;NALP3炎症小体通路是否参与了缺血再灌注损伤;白藜芦醇是否通过抑制NALP3炎症小体通路,而保护心肌缺血再灌注损伤。方法:清洁级雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10):假手术组(Sham组,二甲亚砜-生理盐水2ml/kg)、缺血再灌注组(IR组,二甲亚砜-生理盐水2ml/kg)、低剂量白藜芦醇预处理+缺血再灌注组(L-Res组,二甲亚砜-)、中剂量白藜芦醇预处理+缺血再灌注组(M-Res组,二甲亚砜-白藜芦醇5mg/kg)、高剂量白藜芦醇预处理+缺血再灌注组(H-Res组,二甲亚砜-白藜芦醇10mg/kg),建立心肌缺血再灌注模型,所有组别均于手术结扎前15min经右颈静脉注射药物或生理盐水,术后2h处死动物。电镜和光镜观察心肌超微结构及组织形态改变;Evansblue和TTC双染法估算心肌梗死面积;全自动生化分析仪检测CK-MB和TnT浓度;Real-timePCR检测心肌NALP3、Caspase1、IL-18、IL-1βmRNA表达水平;Westernblot检测NALP3、Caspase1、NF-κBp65的蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血IL-18和IL-1β的含量。结果:(1)病理形态学结果显示Sham组心肌超微结构及组织形态正常;IR组心肌结构破坏严重,白藜芦醇预处理后,其病理形态学变化呈剂量依赖性的得到显著改善。(2)白藜芦醇预处理的各组中,与缺血再灌注组(±%)比较,H-Res组心肌梗死面积明显减少(±%,P<);M-Res组心肌梗死面积也减少(±%,P<),差异仍有统计学意义;L-Res组心肌梗死面积(±%)变化没有统计学意义。(3)缺血再灌注组与Sham组比较,血清TnT(±±,P<)及CK-MB(1715±±,P<)水平均显著上升;不同浓度白藜芦醇预处理后,血清TnT及CK-MB水平成剂量依赖性的降低,M-Res组与缺血再灌注组相比TnT(±±,P<)和CK-MB(1284±±,P<)就显著下降;而H-Res组则下降更明显。(4)与Sham组相比,缺血再灌注后心肌组织中NALP3、Caspase1、IL-1β和IL18mRNA的表达显著增加(,,),而用白藜芦醇干预后他们的表达都得到不同程度的抑制。(5)NALP3、Caspase1、NF-κBp65的蛋白表达水平在心肌缺血再灌注后都显著升高,与Sham组比较,P<;白藜芦醇可以剂量依赖性的降低他们蛋白的表达水平,而且通过相关性分析,NALP3与Caspase1、NF-κBp65蛋白变化水平呈显著正相关,,