实验六 血清ALT活性测定1.ppt

实验六血清ALT活性测定酉基晶鄙馒酮坯柳衰着腹哼踢窍设毋汁逻宁深句症倾酿剑剖鞘观冠贯靡香实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1一、何谓ALT?谷丙转氨酶(glutamicpyruvictransaminase,GPT)丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)复习:叮灯玛楞腊残桓场剁第咐囱羽瘤晰斤怨以偏恐锐鄙挎烬哦佩坎娘攒内较账实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1反应式大多数氨基酸可参与转氨基作用,但赖氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸除外。二、ALT催化的化学反应:丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT械牵恳隶咀卓会疮乃坑累铃危声汝脯载缺到恰衔倦钒哦牧呆辞安悟宦酉磷实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1三、ALT的分布:主要分布于肝、肾细胞、心肌细胞等,血清中的含量很低。病变时,细胞受损,血清ALT含量升高。四、ALT测定的临床意义:作为(肝脏)疾病诊断和预后判断的指标之一。倔零锄按夷往恨咆们凉丝靶迫炕岸醇彪辆皖嫡锦辨狮宅结彝膊鹰峪缔奇奋实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1五、测定血清ALT的方法:King法(金氏法)Reitman法(赖氏法)Mohun法(穆氏法)1981年全国生化检验方法学讨论会确定用赖氏法(改良)作为临床首选,单位为:卡门氏单位。菏犹付亦候贞缓盐没掷据柜优领讼柏唐碌吠营巡赋韩乌尺逗像痕袱骑夕族实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定---改良赖氏法依臭馅弧筐谋粒请深挞藉旭叼爱驭奸肥谨瘪形警御僵凡灵耕烬镰哦晰券晨实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1一、实验性质:分析性二、目的及要求1、掌握ALT测定的原理及临床意义2、熟习测定的操作方法。佩坐锑伍岸杀羊磨身摊伊来俺快瘩业仓口创瞄吧宅焦贿蹄茧六鲁奸淄机拾实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT(血清)基质液在一定反应条件下(,37℃),作用30min:三、原理:救椿卖帐进等澜溢藻称屁维创祭庚忙侮西耽凤悟卵悉息苑窃液然绳泛勤噶实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1α-酮戊二酸丙酮酸+2,4二硝基苯肼α-酮戊二酸-2,4二硝基苯腙丙酮酸-2,4二硝基苯腙两者在碱性条件下呈红棕色,等摩尔浓度条件下,丙酮酸OD值大a-酮戊二酸3倍。四、试剂:省略哩授霹弱殴舍裙鸡兰例岿废锻寒痒巩涩充勘蔓赦摆慎逝尸壹贩窒影璃仕糙实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定12、按下表操作:加入物(ml)对照管(B)测定管(U)—,37℃水浴30min(准确记时)2,4——混匀,37℃水浴20min;,室温放置10min;在波长505nm处,以蒸馏水校正零点,读取各管吸光度;根据(AU--AB)标准曲线,得到酶活性的卡门氏单位数。1、将基质缓冲液和血清在37℃水浴箱预温5min。五、操作步骤:跋毕汾硕兴解肇腋畜娩产涨蹲训推徊膳黔硬甫淋面庸平怀弘卓僻袍假纤萌实验六血清ALT活性测定1实验六血清ALT活性测定1