PCR技术 PPT课件.pps

Polymerase Chain Reaction (PCR)
Donglin Sun
Laboratory of Medical ics
法医学
末代沙皇尼古拉二世家族
1918年,西班牙流感
电影《侏罗纪公园》
辛普森杀妻案
莱温斯基的裙子
Outline
Definition of PCR
History of PCR
Principle of PCR
Elements of PCR Reaction and Optimization of PCR
Applications of PCR
History of PCR
1971: Khorana
1983: Mullis (Invention of PCR)
1985: ”Science”
1987: ”Methods in Enzymology”
1988: Saiki, ”Science”
1993: Nobel Prize
Kary B. Mullis (1944-)
History of PCR
Polymerase Chain Reaction (PCR)
一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、引物和四种dNTP的情况下,通过高温变性(90℃-95℃),低温退火(50℃-65℃,1-2min),中温延伸(65℃-75℃)这样反复循环的过程中,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。
Definition of PCR
Principle of PCR
Three steps: denaturation(变性)
annealing(复性、退火)
extension(延伸)
体内DNA复制
DNA聚合酶
dNTPs
解旋酶类
引物
5’
3’
加热
变性
复性
复温
DNA的变性及复性
引物
延伸
延伸
5’
5’
3’
3’
变性、退火
变性、退火
PCR的原理