头孢西丁耐药的葡萄球菌mecA基因检测及耐药性分析.doc

头孢西丁耐药的葡萄球菌mecA基因检测及耐药性分析
作者:陈颖,宋明胜,周建党,徐令清,伍勇
【摘要】目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的可靠性进行评价,并分析头孢西丁耐药的葡萄球菌即MRS感染及耐药性情况,以指导临床合理用药。方法临床分离葡萄球菌310株,以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断MRS的标准,按美国国家临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)标准操作规程进行头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法(KB法)药敏试验检测MRS,同时检测MRS及甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)对10种常用抗生素的耐药性。结果在310株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌198株,凝固酶阴性葡萄球菌112株,经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)%(113/198),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(S)%(70/112);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,%,特异性为100%;除复方新诺明和万古霉素外,MRS对其余8种抗生素的耐药率明显高于MSS,差异具有统计学意义(P<)。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测MRS的常规方法;MRS的感染发生率及耐药性较高,且对各类抗生素多重耐药,需加强其耐药性监测。
【关键词】头孢西丁;葡萄球菌;耐药性分析;mecA基因
葡萄球菌是引起医院感染的常见病原菌,其中耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin
resistant us, MRS)有逐渐上升的趋势,并具有多重耐药性,所造成的医院感染一直是临床普遍关注的问题。为及时准确地掌握MRS的感染率及耐药率,我们采用PCR方法检测葡萄球菌mecA基因为判断MRS的标准,按照美国国家临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)标准操作规程进行头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法(KB法)药敏试验检测了310株葡萄球菌,同时检测了其对10种常用抗生素的耐药性,并且进行了统计分析,现将结果报告如下。
1 材料与方法
材料
菌株
我院2006年1月至2006年6月临床分离葡萄球菌310株,其中金黄色葡萄球菌198株、表皮葡萄球菌47株、腐生葡萄球菌36株、溶血葡萄球菌29株,25923。
试剂
苯唑西林(OX)、头孢西丁(FOX)、头孢唑啉(CZO)、氨苄西林(AMP)、红霉素(ERY)、克林霉素(CLI)、万古霉素(VA)、复方新诺明(SXT)、阿米卡星(AMK)、利福平(RA)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)纸片以及药敏培养基(MH琼脂)均购自OXOID公司;PCR扩增所需试剂均为上海生工工程公司产品,上游引物P1:5′TGGCTATCGTGTCACAATCG3′,下游引物P2:5′CTGGAACTTGTTGAGCAGAG3′,扩增片段为310bp。
仪器
BioRad icycler荧光定量PCR系统。
方法
纸片扩散法
按CLSI/NCCLS标准操作规程进行,检测各菌株对每种药敏纸片的敏感性,25923为标准质控菌株,药敏结果依据CLSI/NCCLS(2006年)判断。
mecA基因检测(PC