Bax蛋白表达抑制缺血性大鼠心肌细胞凋亡.doc

麝鼠香调控Bcl-2/Bax蛋白表达抑制缺血性大鼠心肌细胞凋亡
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
【摘要】目的研究麝鼠香(Muskrat musk,Mrm)对大鼠心肌缺血(myocardial ischemia, MI)模型心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制大鼠MI模型。实验动物随机分为6组:假手术组、模型组、阳性对照组、麝鼠香高、中、低(600、300、150mg·kg-1·d-1剂量组)。采用原位末端标记(TUNEL)法进行细胞凋亡指数检测;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与模型组比较,麝鼠香高、中剂量组心肌细胞凋亡指数明显降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义()。结论麝鼠香通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达,能有效抑制心肌细胞凋亡的发生,对缺血心肌提供保护作用。
【关键词】麝鼠香;心肌缺血;细胞凋亡;Bcl-2;Bax
麝鼠香(Muskrat musk,Mrm)为成年雄性麝鼠(Ondadra zibethica L.)香囊内乳白色分泌物。麝鼠在我国资源分布广,数量较多,且早在《回回药方》中就有记载,称之为“木阿里”[1],并在回族民间广为流传。麝鼠香不仅具有与天然麝香相似的香气,而且还含有很多相同的化学成分,如麝香酮(muscone)、降麝香酮(cyclopentadecanone)、大环酮类、肽和氨基酸类等[2],具有抗炎、镇痛等与天然麝香极为相似的药理作用[3]。麝鼠香在降低心肌耗氧量及改善血液流变学方面,对犬及大鼠缺血心肌起到保护作用[4]。本研究拟探讨麝鼠香对大鼠急性心肌缺血损伤后期心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。
1 材料与方法
动物
健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,体重250~280g,由宁夏医科大学实验动物中心提供。
主要仪器及药品
LDZ5-2医用离心机(北京医用离心机厂生产);Olympus BH-2型显微镜(Olympus Corp, Japan);BL-2000医学图像分析系统(成都泰盟科技有限公司生产)。
麝鼠香(吉林省康乃尔药业提供,批号:090510);复方丹参滴丸(天津天士力集团生产,批号:090112);细胞凋亡检测试剂盒(南京凯基生物工程科技发展有限公司提供,批号:090606);Bcl-2一抗、Bax一抗、即用型SABC试剂盒及DAB显色剂(武汉博士德生物工程有限公司提供)。
方法
建立模型采用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血模型[5]。先将所有大鼠测试心电图(标准Ⅱ导联),心电图异常者剔除。选取合格大鼠,乙醚麻醉,胸部备皮,常规消毒后,在切口周围做荷包缝合准备(以备关闭胸腔),沿锁骨正中线行切开皮肤术,在第四或第五肋间钝性分离胸部肌肉,打开胸腔,剪开心包,挤出心脏。在动脉圆锥与左心耳之间以无创性缝合线结扎冠状动脉,速将心脏置回胸腔内,并迅速拉紧荷包缝合线,关闭胸腔,开胸时间不超过60s。以结扎处周围心肌变白、搏动减弱且心电图出现ST段弓背向上抬高者为造模成功大鼠。术后