DAPI染色.doc

DAPI介绍在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。当DAPI与双股DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm,其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。DAPI也可以和RNA结合,但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果,其发散光的波长范围约在400nm左右。 DAPI的发散光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白(Greenfluorescentprotein,GFP)或TexasRed染剂(红色荧光染剂)的发散波长,仅有少部分重叠,研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。 DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。 DAPI 中文名:4,6-联脒-2-苯基吲哚(?) 英文名:4',6-diamidino-2-phenylindole,2-(4-amidinophenyl)-1H-indole-6-carboxamidine,DAPIdihydrochloride 分子式:C16H15N5 分子量: CASnumber:28718-90-3 光谱性质:与双链DNA结合时最大吸收/最大发射为358nm/461nm;与RNA结合时,最大发射移动到400nm左右。编辑本段DAPI染色原理染色原理: DAPI为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100%),且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。 a、正常的烟