DAPI溶液染色说明.doc

DAPI溶液染色说明书华越洋----------------------------------------------------------------保存:-20℃避光保存。说明:华越洋的DAPI溶液(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与DNA中大部分A,T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或TexasRed染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。DAPI溶液,纯度≥90%,为即用型工作液,可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。使用方法:(仅供参考)1,固定细胞或组织样品,经过固定后,适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,可先进行免疫荧光染色,染完毕后再进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI染色。2,对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。3,室温染色5-10分钟。4,吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。5,置于荧光显微镜下观察,激发波长360-400nm。DAPI溶液注意事项:DAPI被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。本产品需避光,并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题,建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。