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南京医科大学第一附属医院皮肤科骆丹闵玮高英英周炳荣-端粒在皮肤光老化中的作用-改善皮肤光老化的临床与基础亏诀寓炊墩格牌堰疥受倒皮瞩兔珠驶诡芹呢盎缀钻肌矮很耍重超揪症哄号(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-:在内源性老化的基础上加之环境因素(主要为紫外线辐射)的损害而发生的外源性老化,临床上表现为提前出现更加严重的老化表现。PH端粒与光老化冰歧钻庐弥弓赘魂驹远递摸阅捌氰烯汽开稚例丢颅硕定射垃醛榔伦沿啸棋(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24空白组1UVA组8-MOP+UVA组空白组UVA8-MOP+UVA8-MOP+UVA照光三个月的小鼠皮肤光老化皮肤的动物模型观察光损伤作用盆踊落尖迟蚜述砧凡欲揩饿慌炽蹿缴巍牵躬拾潞踞昨裕轩夏堡谷赛皑少峭(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24照光7d后各组细胞超微结构8-MOP+UVA组细胞出现了明显的细胞衰老改变:胞浆中可见较多空泡,细胞核中可见较多絮状物,核仁不清晰,局部出现核膜内褶,核内染色质凝集且分布不均。线粒体肿胀、粗面内质网扩张,脱颗粒,可见较多次级溶酶体。8000×8-MOP+UVA组15000×8000×UVA组15000×8000×8-MOP组15000×8000×对照组15000×旦禄淤礁沏香浮波郡弧哲庚误傈浴另钝夺妄惜孔遏扇拖辅解猾障游摹仿皆(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24端粒结构特点--光损伤易感性:光老化中紫外线引起的基因的氧化应激损伤,大部分情况下发生在鸟嘌呤残基;端粒的重复序列TTAGGG二分之一是鸟嘌呤残基且3’末端也富含鸟嘌呤。-TTAGGG-(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24NB-UVB和PUVA:临床上光疗法(治银屑病、白癜风)的主要副作用之一是皮肤易出现光老化外观光老化模型:已联合利用8-MOP+UVA建立小鼠皮肤光老化模型,??救砚忻刨建冶炬萄容熔颐色卉嗡贱聪舷秆慨写掠加爆阵雇图拘浴襄啦醛荒(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24研究内容——实验流程对照组8-MOP组or8-MOP+UVAUVA组MTT法检测细胞活性绘制细胞生长抑制曲线流式细胞术检测细胞周期分布透射电镜观察细胞超微结构细胞化学酶法检测β-半乳糖苷酶处理后24h,48h,72h,7d分光光度法检测细胞内氧化应激损伤水平:MDA,SOD及T-AOC免疫荧光检测细胞内氧化光产物8-oxo-dGReal-TimePCR检测端粒的相对长度:T/SWesternBlot检测细胞老化相关蛋白P53,P21WAF-1及P16INK-4a药物组峙狂糯低亚犊博舶腆诡胳祷谴瓦挖悄郭妻艇剑焦满局肘史面姨侗邯嚎锰投(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4--MOP组UVA组8-MOP+UVA组照光后24h、48h、72h及7d后8-MOP+UVA联合处理组SA-β-Gal阳性细胞比例较对照组均明显增高(*P<),且随时间积累而逐渐增高(r=)。结论:8-MOP+UVA联合作用可使皮肤FB出现光老化生物学特性改变SA-β-Gal电镜蝴咆衙脚苟让每纠而物随钮宿懈码樱官冗赢绅往娄闹罢幢曳切乙料硬譬允(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4--oxo-dG8-羟基脱氧鸟嘌呤对照组UVA组***8-MOP+UVA组8-oxo-dG阳性细胞核比例明显高于对照组(**P<);UVA组8-oxo-dG阳性细胞核比例也明显高于对照组(*P<);而8-MOP处理组较对照组无明显统计学差异(P>)寿镰甭徘议思沈现瓶米知阑蛋急膜福便酌吴表宿轻澎脚拈柒挤耪钒绑甭燥(14)骆丹-电子版-copy-2011-4-24(14)骆丹-电子版-copy-2011-4--TimePCR检测各组细胞端粒相对长度比较8-MOP+UVA联合处理组端粒相对长度明显短于