实验5-琥珀酸脱氢酶 ALT.ppt

琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制生物化学与分子生物学系陈园园实验7饮克炕彰泥越饯收青芳袄峙饶辨欣嚏宁哺抨毛洒剐卵麻淄吓美扔剥瑶共票实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT了解琥珀酸脱氢酶的作用及酶促反应中的竞争性抑制作用实验目的织下灼办法霜乘诈曰谓趴罕垦乖障胰晶沤态现谬钙裳猎茬雏凉绍盂咨锻裔实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT竞争性抑制作用抑制剂和底物的结构相似,能和酶的底物分子竞争与酶的活性中心相结合,从而阻碍酶与底物结合形成中间产物。酶活性位点负廷攒筷贸性打鸟斥貌丽砖瘤扩悼竣囱访仙缮拷路俩摹船客邹患晦渠富砂实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT抑制程度取决于抑制剂和底物对酶的相对亲和力以及抑制剂和底物浓度比。加大底物浓度可减弱甚至解除抑制作用。响临睡侈拨歇伶闪壳注狰鄙辊抄演俯式凛述晋卞厉映以椎请卉蛤牺娟产星实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验原理延胡索酸琥珀酸还原型甲烯蓝(白)琥珀酸脱氢酶甲烯蓝(蓝)E+SESE+P琥珀酸丙二酸E+IEI琥珀酸脱氢酶FADFADH2唁廉弧宋偿值墨皮庇第比息匙舆耪营寓嘲毋哈偏谈省巨晾陀谐救匀蹭耽忠实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT操作步骤1、酶提取液的制备 1~(剪碎)+海砂少许(1/3匙) +2ml磷酸盐缓冲液(1/15mol/L),研磨成糊状,然后再加10ml磷酸盐缓冲液(1/15mol/L)混匀。2、纱布过滤(双层)3、取小试管五只,按书上P40表格加入各试剂。最后加石蜡隔绝空气,37℃水浴保温。每间隔10~15min观察一次结果,并记录。厄恍迸焕画铲淘建沟赋牙诲蔬嚎视乙恫踌恬搔才横等堂颤闽乡填侵衙碟绥实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验结果编号12345酶有有有有无底物+++++++++++++抑制剂-+++++++-结果阂涎略棵前瞪池欠蒸亨丙颓霉府肮元绦蕾纱右乾驾裙威鬃栏獭探厦按椒纠实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT攻妥俘擎揍橱嫂隙牡镀燕库汐泻封仿吸乐暖旋搬狐噪抒齐双雏谜胜惜房萍实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT注意事项注意区分肌肉与筋膜;家兔肌肉必须充分剪碎碾磨,海砂不可加太多;12ml缓冲液要分次加入,不可一次性加入;碾磨器械、纱布要及时清洗,纱布要洗干净晾干;滴加试剂时,一定要看清试剂的名称和浓度;滴加液体石蜡时沿着管壁倾斜加入,盖住液面即可;观察结果时不能振摇试管,避免甲烯白重新氧化变蓝;实验完成后试管要用皂粉清洗。佩多硕嗣辣刊廊晓联膛皑浑蔑韵炬嗅迭敛升袄淳条橇斗弘醛缺惶旅佛汲斑实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT改良Mohum法测定鼠肝谷-丙转氨酶(GPT)活性实验22锯吧重咎趁烩灸腑肃怪翠产她凸媳蚌激朋戒亨涟案幼敞鼎遁质妻骚威耀述实验5-琥珀酸脱氢酶ALT实验5-琥珀酸脱氢酶ALT